天府系列花生內(nèi)生細(xì)菌的分離及種群多樣性研究.pdf

1、內(nèi)生細(xì)菌是促進(jìn)植物生長，提高植物抗病抗逆能力的有益微生物資源，廣泛分布于各種植物體內(nèi)。本研究通過調(diào)查目前四川省花生種植推廣品種——天府系列的內(nèi)生細(xì)菌資源，研究了花生內(nèi)生細(xì)菌的種群組成及其分布規(guī)律，揭示了花生內(nèi)生細(xì)菌的多樣性及優(yōu)勢菌種分布，為促生抗病內(nèi)生細(xì)菌的篩選和在可持續(xù)農(nóng)業(yè)中的應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。結(jié)果如下： 1.通過對花生內(nèi)生細(xì)菌自然種群的分離鑒定，明確了芽孢桿菌屬(Bucillus)為花生內(nèi)生細(xì)菌的主要種群。利用平板稀釋分離法，從

2、四川省3個花生推廣品種天府11號、12號、13號和對照岳易的不同生育期、不同部位中分離獲得220株內(nèi)生細(xì)菌。采用傳統(tǒng)分類法共鑒定出17個屬，包括芽孢桿菌屬(Bacillus)、微球菌屬(Micrococcus)、歐文氏菌屬(Erwinia)、不動細(xì)菌屬(Acinetobacter)、節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)、棒狀桿菌屬(Corynebacterium)、產(chǎn)堿菌屬(Alcaligenes)、分枝桿菌屬(Mycobacteriu

3、m)、芽孢八疊球菌屬(Sporosarcina)、腸桿菌屬(Enterobacter)、黃桿菌屬(Flavobacterium)、庫特氏菌屬(Kurthia)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、黃單胞菌屬(Xantomonas)、變形菌屬(Proteus)、慢生根瘤菌屬(Bradyrhizobium)和鏈霉菌屬(Streptomyces)。 Enterobacter、Flavobacterium、Kurthia、Pseudo

4、monas、Xantomonas、Proteus分布最少，Bacillus、Micrococcus、Erwinia則為花生內(nèi)生細(xì)菌的常見菌群，其中Bacillus是優(yōu)勢菌，數(shù)量最多，分布最廣，鑒定出11個種，包括巨大芽孢桿菌(B.megaterium)、枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、短小芽孢桿菌(B.pumilus)、地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)、蠟質(zhì)芽孢桿菌(B.cereus)、堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌(B.firmus

5、)、凝結(jié)芽孢桿菌(B.coagulans)、球形芽孢桿菌(B.sphaericus)、蕈狀芽孢桿菌(B.mycoides)、嗜熱脂肪芽孢桿菌(B.stearothermophilus)、緩病芽孢桿菌(B.lentimorbus)。巨大芽孢桿菌是其中最優(yōu)勢的菌，是所有品種的常住菌群；枯草芽孢桿菌也在每個品種(至少有一個生育期)中都能分離到。非芽孢桿菌中，微球菌屬是每個品種的常住菌群；歐文氏菌屬能定殖在每個品種中。各品種芽孢桿菌的總數(shù)量在內(nèi)

6、生細(xì)菌總數(shù)量中所占的比例為：花期83.3％，收獲期57.1％。 各品種不同生育期分離的內(nèi)生細(xì)菌總數(shù)及其種群多樣性有較大差異，但可以看出一個共同的規(guī)律：各品種苗期的內(nèi)生細(xì)菌數(shù)目都為最高，苗期的種群多樣性指數(shù)也都是處于最高或次高位置，除了天府12號的種子略高于苗期0.02之外，其余各品種苗期多樣性指數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他生育期。 2.根據(jù)形態(tài)學(xué)觀察判定，分離出的15株放線菌屬于鏈霉菌屬的6個類群5個亞群。每個花生品種中都有放線菌分布

7、。葉是其分布最廣的部位，莖中則最少。天府13號和岳易的種子中，也分別分離出3株放線菌。 這15株放線菌中除11-03和12-07外，各菌株對枯草芽孢桿菌都有不同程度的拮抗作用，但對大腸桿菌都不具有拮抗作用。同為鏈霉菌屬淡紫灰類群的11-02和13-10拮抗作用最好。 3.通過結(jié)瘤試驗(yàn)，分析現(xiàn)瘤時間、結(jié)瘤數(shù)、瘤的分布、植株株高、干重、含氮量、葉綠素含量，從50株根瘤菌中篩選獲得能在所有供試品種上結(jié)瘤固氮的廣譜菌株H22。該