Cathepsin D表達水平變化對Raji細胞增殖及阿霉素敏感性的影響.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文CathepsinD表達水平變化對Raji細胞增殖及阿霉素敏感性的影響姓名：萬海燕申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液?。┲笇?dǎo)教師：王欣20090505山東大學(xué)碩士學(xué)位論文ADM處理48h。四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測不同密度Raji細胞的增殖曲線，據(jù)此選取適宜用來進行48h內(nèi)Raji細胞的增殖活性測定的細胞密度。MTT法測定細胞增殖抑制率，以ADM的48hIC50作為本實驗的工作濃度。Westernblot法檢測

2、ADM處理前后各組Raji細胞Cath—D表達水平的變化。MTT法檢測用PepA預(yù)處理后，Raji細胞對ADM敏感性的變化。3統(tǒng)計學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均用DPSV311專業(yè)版軟件分析。數(shù)據(jù)采用Xs、百分率表示，多組間均數(shù)比較采用方差分析，兩組間均數(shù)比較采用f檢驗，兩參數(shù)間的相關(guān)性采用Spearman等級檢驗。結(jié)果：1、在72h之內(nèi)，細胞密度為1X1035X104／mL范圍內(nèi)，隨時間延長，細胞呈線性關(guān)系生長(圖1)。細胞懸液密度為5X103]m

3、L時，72h內(nèi)MTT測定的OD值在可信區(qū)間范圍內(nèi)，且與時間呈良好的線性關(guān)系，適宜用來進行48h內(nèi)Raji細胞的增殖活性測定。2、ADM工作濃度濃度為1、2、4、8、161xg／mL的ADM作用于Raji細胞48h后的抑制率分別為(1759426)、(4420605)、(6461252)、(73824332)和(79364121)％。48hADM的IC50為315Irtg／mL，并以此藥物濃度為工作濃度進行各項實驗。3光學(xué)顯微鏡下細胞形態(tài)

4、學(xué)變化光學(xué)顯微鏡結(jié)果顯示正常培養(yǎng)條件下Raji細胞為飽滿的圓形，懸浮生長，突起較少，胞體透亮，折光性好，胞內(nèi)顆粒較少，相鄰細胞生長融合成片，生長狀態(tài)良好。經(jīng)ADM處理后，胞體內(nèi)顆粒逐漸增多，細胞間連接消失，胞體變大或收縮、出泡，細胞核高度凝聚，或者碎裂呈梅花樣，細胞形態(tài)變得模糊，不完整，有的可見凋亡小體形成，隨著作用濃度增高，凋亡細胞數(shù)增多，凋亡形態(tài)更明顯(圖2、圖3)。4、處理前后各組CathD表達水平變化CathD在Raji細胞中有