α7煙堿型受體調(diào)控膽管癌細(xì)胞增殖、凋亡及侵襲的觀察研究.pdf

1、中文摘要僅7 煙堿型受體對(duì)膽管癌細(xì)胞增殖凋亡及侵襲影響的觀察研究中文摘要目的l通過觀察尼古丁及a —B T X 刺激后的膽管癌細(xì)胞增殖及侵襲能力的差異，初步探討a 7 煙堿型乙酰膽堿受體對(duì)膽管癌細(xì)胞增殖及侵襲的調(diào)控作用，同時(shí)對(duì)其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行初步探討。方法l1 ．應(yīng)用M T T 法檢測(cè)a 7 煙堿型受體激動(dòng)劑尼古丁及其阻斷劑a - B T X 對(duì)膽管癌細(xì)胞Q B C 9 3 9 增殖的影響；．2 ．應(yīng)用t r a n s w e l l

2、侵襲模型檢測(cè)尼古丁及a - B T X 對(duì)Q B C 9 3 9 細(xì)胞侵襲能力的影響：3 ．觀察尼古丁及a - B T X 預(yù)處理膽管癌細(xì)胞經(jīng)5 一f u 處理后細(xì)胞形態(tài)及克隆形成率變化；4 ．應(yīng)用R T - P C R 檢測(cè)經(jīng)尼古丁及a - B T X 處理后膽管癌細(xì)胞中抑癌基因P T E N 表達(dá)情況；結(jié)果：經(jīng)僅7 煙堿型受體激動(dòng)劑尼古丁處理后，在4 8 h 、7 2 h 時(shí)隨尼古丁刺激濃度的升高，其促增殖能力也越強(qiáng)( 4 8 h

3、：F = 8 0 ．8 6 ，PO ．0 5 ) ，而4 8 h及7 2 h 的促增殖作用較顯著，且4 8 h > 7 2 h ( P0 ．0 5 ) ，a - B T X 組與對(duì)照組英文摘要E x p e r i m e n t a l s t u d y o n t h e r e g u l a t o r y e f f e c t o f Q7 一a c e t y l c h o l i n er e c e p t

4、o ro nc e l l p r o l i f e r a t i o n ，a p o p t o s i sa n d i n v a s i o no b s e r v i n gn e u r a li n f i l t r a t i o ni nc h o l a n g i o c a r c i n o m aA b s t r a c tO b j e c t i v e ：T os t u d y e f f

5、 e c to fn7 A c h R a g o n i s tn i c o t i n ea n da n t a g o n i s t Q - B T X o nc e l lp r o l i f e r a t i o n , a p o p t o s i sa n di n v a s i o n o fb i l e d u c t c a r c i n o m ac e l l l i n e Q B C 9 3

6、 9 ，a n dP r e l i m i n a r yP r o b eo nt h er e g u l a t o r ye f f e c ta n dr e l a t e dM e c h a n i s m o fQ7 - a c e t y l c h o l i n er e c e p t o r o n c e l lp r o l i f e r a t i o na n d i n v a s i o n

7、．M e t h o d s ：1 ．M ，?！痑 s s a yW a s c a r r i e do u t t od e t e r m i n e t h er o l eo f a7 A c h R a g o n i s t n i c o t i n ea n d a n t a g o n i s t Q - B T X i np r o l i f e r a t i o no f Q B C 9 3 9 c e l

8、 l s ．2 ．t r a n s w e l li n v a s i o n m o d e lW a S u s e d t od e t e r m i n e e f f e c to f a7 A c h R a g o n i s tn i c o t i n ea n da n t a g o n i s t Q - B z 》( i I li n v a S i o no f Q B C 9 3 9 c e l l

9、s ．3 ．D e t e c t t h e e f f e c t o fn i c o t i n e a n d Q ．B T X p r e t r e a t m e n to nt h e s u r v i v e a b i l i t y o fc h o l a n g “ o c a r c i n o m a c e l l s w h e na p p l i e d 、7 l ，i m 5 一H Jb yu

10、 s i n gM T T a n dF l a t c l o n i n gf o r m a t i o n e x p e r i m e n t ．4 ．I m P C Rw a su s e dt od e t e r m i n et h ee f f e c to f a7 A c h Ra g o n i s tn i c o t i n ea n d a n t a g o n i s tQ - B Ⅸi n t h

11、 ee x p r e s s i n g o f P T E N o f Q B C 9 3 9 c e l l s ．R e s u l t s ：W i t h t h e s t i m u l a t e c o n c e n t r a t i o n o f n i c o t i n e i n c r e a S e d ，t h e a b i l i t y o fp r o l i f e r a t i o

12、nw a ss i g n i f i c a n te n h a n c e di n4 8 h a n d7 2 h ( 4 8 h ：F = 8 0 ．8 6 ，P0 ．0 5 ) ，b u ta l s o4 8 h >7 2 h ．M e a n w h i l e ，c o n t r a s t w i t h o t h e r e x p e r i m e n t g r o u p ，t h e q u a