硫氧化還原蛋白在胰腺癌及癌旁組織中的表達(dá)及意義.pdf

1、胰腺癌是人體常見的惡性腫瘤之一,近年來發(fā)病逐年增多.胰腺癌的病程短,進(jìn)展快,早期無明顯或特異的癥狀和體征,臨床診斷時(shí)大多屬晚期,具有高度侵襲性,多存在鄰近器官和血行轉(zhuǎn)移,預(yù)后極差.盡管手術(shù)技術(shù)不斷改進(jìn),術(shù)后支持不斷完善以及輔助性化療和放療的配合應(yīng)用,但絕大多數(shù)胰腺癌患者仍死于癌癥.通常一年生存率不到10﹪,五年生存率不到1﹪,中位生存期僅為3～4個(gè)月,對(duì)放療不敏感,對(duì)當(dāng)前化療的反應(yīng)性極差,單藥化療近期療效低于10﹪.目前急需尋找新的更為

2、有效的治療方法,以解決這些難題. 氧化還原過程與細(xì)胞生長和正常行使功能密切相關(guān).自從發(fā)現(xiàn)硫氧還蛋白以來,越來越多的證據(jù)表明,硫氧還蛋白和硫氧還蛋白還原酶以及NADPH一起協(xié)同作用,組成一個(gè)廣譜的蛋白二硫鍵還原體系,在穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)氧化還原環(huán)境、保持細(xì)胞免受有害的氧化壓力的刺激以及調(diào)節(jié)蛋白-蛋白、蛋白-核酸相互作用等方面起重要作用.而且,細(xì)胞的氧化還原狀態(tài)與一些疾病的發(fā)生(如艾滋病、腫瘤、缺血性疾病)密切相關(guān).在人類的多種腫瘤中均存在

3、硫氧還蛋白和硫氧還蛋白還原酶的異常表達(dá),對(duì)于腫瘤發(fā)生機(jī)制的研究及抗癌藥物的開發(fā),硫氧化還原系統(tǒng)提供了一個(gè)頗有吸引力的靶標(biāo),成為國際上研究的熱點(diǎn). 實(shí)驗(yàn)方法: 采用RT-PCR檢測胰腺癌及癌旁組織中Trx-1的mRNA含量,采用Westernblotting檢測胰腺癌及癌旁組織中Trx-1的蛋白表達(dá)量. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用SPSS13.0軟件完成,計(jì)量資料數(shù)據(jù)表示方式以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD),兩組計(jì)量資料采用非

4、獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),各組指標(biāo)間的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析.P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性意義. 結(jié)果: Westem blotting:30例癌組織24例中Trx-1過表達(dá),23例癌旁組織Trx-1低表達(dá).采用Kodak DNA Analysis 1D圖像分析軟件進(jìn)行光密度分析,讀取癌及癌旁組織Trx-1目的條帶和β-actin目的條帶的光密度值,分別計(jì)算Trx-1表達(dá)量RI值,RI=Trx-1條帶光密度值/

5、β-actin條帶光密度值.使用t檢驗(yàn)進(jìn)行Trx-1在癌及癌旁組織中的表達(dá)量比較.24例胰腺癌組織光密度值(0.81±0.10)明顯高于癌旁組織光密度值(0.30±0.11)(P=0.000).胰腺癌組織中Trx-1表達(dá)量與分化程度無關(guān),高分化與中低分化無顯著性差異(P=0.08).而與腫瘤TNM分期有關(guān),Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌組織的Trx-1表達(dá)量有顯著性差異(P=0.003). RT-PCR:30例癌組織26例中Trx-1

6、過表達(dá),25例癌旁組織Trx-1低表達(dá).采用Kodak DNA Analysis 1D圖像分析軟件進(jìn)行光密度分析,讀取癌及癌旁組織Trx-1和β-actin目的條帶的光密度值,分別計(jì)算Trx-1 mRNA指數(shù)RI,RI=Trx-1 mRNART-PCR產(chǎn)物光密度值/β-actin mRNA RT-PCR產(chǎn)物光密度值.RI反映Trx-1 mRNA在癌及癌旁組織的相對(duì)表達(dá)強(qiáng)度.使用t檢驗(yàn)進(jìn)行Trx-1 tuRNA在癌及癌旁組織的表達(dá)量比較.

7、26例胰腺癌組織RI值(0.80±0.08)明顯高于癌旁組織RI值(0.39±0.15)(P=0.000).胰腺癌組織中Trx-1 mRNA表達(dá)量與分化程度無關(guān),高分化與中低分化的RI值無顯著性差異(P=0.40).與TNM分期有關(guān),Ⅰ、Ⅱ期與Ⅲ、Ⅳ期胰腺癌組織的Trx-1 mRNA表達(dá)量有顯著性差異(P=0.000). 結(jié)論:硫氧化還原蛋白在缺氧和氧化應(yīng)激環(huán)境下促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活和胰腺癌的進(jìn)展,在胰腺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要的