四個先天性眼球震顫家系致病基因的定位與克隆.pdf

1、背景：先天性眼球震顫(congenital nystagmus，CN)是一種較為常見的遺傳性疾患，以發(fā)作性有節(jié)律的雙側眼球震顫為典型癥狀，多在嬰兒期起病，眼球震顫伴隨終生。先天性眼球震顫無神經(jīng)或視覺系統(tǒng)異常，是一種特發(fā)性的疾病，目前致病機理不清。先天性眼球震顫遺傳方式復雜，存在遺傳異質(zhì)性，最近有文獻報導認為FRMD7基因的突變能導致該病的發(fā)生。本實驗室同浙江大學附屬二醫(yī)院合作收集了4個先天性眼球震顫家系，家系1的基因定位研究已于2004

2、年完成，連鎖分析將其致病基因定位于Xq26-27；家系2和家系3均呈X一連鎖，有足夠的樣本，符合做連鎖分析的條件；家系4僅1代共3名患者，遺傳模式不明。 目的：本研究的目的是：確定家系2、家系3致病基因位點；克隆四個先天性眼球震顫家系的致病基因。 方法與結果：根據(jù)每個家系不同的情況，我們采取不同的方法進行研究。首先，采用連鎖分析對家系2、家系3致病基因進行排除定位，我們利用x染色體上的微衛(wèi)星標記進行基因分型，再進行連鎖分

3、析，使用連鎖分析軟件包中的M-link程序計算LOD值，家系2在DXS8041、DXS8033、和DXS1062處得到最大LOD值1.76，家系3在DXS8009、DXS8041、DXS8094、DXS1062處得到最大Lod值1.16。根據(jù)單體型分析推斷致病基因位于DXS1047與DXS8094之間?？赡芘c位于Xq26.2的FRMD7基因連鎖。根據(jù)家系致病基因的定位結果，我們對4個先天性眼球震顫家系進行FRMD7基因突變檢測，PCR擴

4、增FRMD7基因的編碼區(qū)及內(nèi)含子與外顯子交界區(qū)域，直接測序分析尋找突變。結果分別在家系1、2、3中找到了致病突變，家系1中發(fā)現(xiàn)c．781C>G，家系2中發(fā)現(xiàn)c．886G>C，家系3中發(fā)現(xiàn)c．1003C>T，其中c．781C>G和c．886G>C是未被報道的新突變，這3個突變在家系中都與疾病表型共分離，在100個家系外正常對照中也未發(fā)現(xiàn)這些突變。3個突變分別導致FRMD7基因編碼產(chǎn)物發(fā)生R261G(精氨酸→甘氨酸)、G296R(甘氨酸→精