川芎嗪對(duì)大鼠急性脊髓損傷模型P-選擇素、中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶表達(dá)的影響.pdf

1、目的：利用大鼠急性脊髓損傷模型，觀察損傷段脊髓組織中P-選擇素的表達(dá)和中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的含量，以及川芎嗪干預(yù)對(duì)損傷段脊髓組織中P-選擇素的表達(dá)和中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶含量的影響。探討川芎嗪對(duì)急性脊髓損傷的保護(hù)作用及可能機(jī)制。 材料和方法：正常成年Sprague Dawley（SD）大鼠99只，體重250～300g，隨機(jī)分成三組：（1）空白組（S組，n=9）；（2）對(duì)照組（C組，n=45）；（3）治療組（T組，n=45）。治療組

2、和對(duì)照組大鼠按術(shù)后動(dòng)物存活的時(shí)間各分為1小時(shí)組，3小時(shí)組，6小時(shí)組，12小時(shí)組、1天組、3天組、5天組、7天組和14天組，共9個(gè)亞組，每個(gè)亞組5只大鼠。利用90只大鼠，采用改良Allen's重物打擊法制作胸10水平急性脊髓中度損傷模型。治療組大鼠傷后30分鐘后開始予川芎嗪注射液經(jīng)腹腔內(nèi)注射200mg/kg，每天給藥一次，存活時(shí)間少于5天者用藥至死，多于5天者用藥5天。對(duì)照組大鼠給予等量的生理鹽水經(jīng)腹腔內(nèi)注射，給藥次數(shù)和治療組相同。采用改

3、良Rivilin斜板試驗(yàn)、BBB評(píng)分（the Basso，Beattie，Bresnahan locomotor rating scale）和聯(lián)合行為評(píng)分（combined behaviour scores，CBS）對(duì)各組大鼠脊髓功能進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分。根據(jù)分組，在建模后相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死對(duì)應(yīng)大鼠獲取脊髓標(biāo)本，每只大鼠取以損傷點(diǎn)為中心的長約2cm的脊髓組織。在受損段脊髓標(biāo)本中心橫行切開兩半，一半作P-選擇素的免疫組化染色，觀察脊髓灰質(zhì)中P-選擇

4、素陽性血管表達(dá)情況并計(jì)數(shù)；一半用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的含量。使用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對(duì)對(duì)照組和治療組進(jìn)行兩獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，分析比較兩組行為學(xué)評(píng)分是否存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，兩組大鼠脊髓標(biāo)本不同時(shí)間點(diǎn)P-選擇素的表達(dá)和中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶的含量是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。 結(jié)果：隨著時(shí)間推移，術(shù)后改良Rivlin斜板試驗(yàn)顯示斜板臨界度數(shù)均值逐漸升高，治療組較對(duì)照組斜板臨界度數(shù)高，術(shù)后7天及14天時(shí)，兩組間斜板臨界度數(shù)比較

5、有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 術(shù)后BBB評(píng)分均值逐漸升高，治療組較對(duì)照組評(píng)分值高，術(shù)后5天、7天和14天時(shí)，治療組和對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 術(shù)后CBS評(píng)分均值逐漸下降，治療組較對(duì)照組評(píng)分值低，術(shù)后5天、7天和14天時(shí)，治療組和對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05）。 術(shù)后1小時(shí)脊髓灰質(zhì)P-選擇素表達(dá)陽性血管計(jì)數(shù)開始升高，對(duì)照組和治療組均在術(shù)后1天達(dá)到高峰。術(shù)后1天、3天、5天和7天4個(gè)時(shí)間點(diǎn)上，陽性血