清肺培元顆粒對(duì)免疫低下肺部感染小鼠模型T淋巴細(xì)胞亞群、IL-12、TNF-α的影響.pdf

1、　　目的：
　　通過建立免疫低下肺部感染小鼠模型,探討清肺培元顆粒對(duì)免疫低下肺部感染小鼠的免疫功能以及肺功能的影響,闡述清肺培元顆粒對(duì)防治免疫低下肺部感染的作用機(jī)理,為清肺培元顆粒臨床應(yīng)用以及療效評(píng)價(jià)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　1 動(dòng)物分組：將 90 只清潔級(jí)近交系 BALB/c 雌性小鼠,隨機(jī)分為九組,每組 10只,即正常對(duì)照組、Friend鼠白血病病毒組(FLV組)、模型組、齊多夫定組(AZT組)、

2、唐草片組、清肺培元顆粒加左氧氟沙星組(中西藥組)、清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組、清肺培元顆粒低劑量組。
　　2 動(dòng)物造模與用藥：適應(yīng)性喂養(yǎng) 3d 后,除正常組外其他各組腹腔注射 0.5ml 的FLV 病毒懸液,觀察 21d,21d 后鼻腔滴注Ⅲ型肺炎鏈球菌,建立免疫低下肺部感染小鼠模型。根據(jù)體表面積換算法計(jì)算出各組小鼠的給藥劑量,在造模成功1d后,各組小鼠每天灌胃給予相應(yīng)的藥物干預(yù),正常對(duì)照組、FLV組、模型組給

3、予0.5%羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)水灌胃,給藥體積為0.2ml·10g-1,其它治療組給予相應(yīng)的藥物灌胃。末次給藥前12小時(shí)動(dòng)物禁食,不禁水。
　　3 指標(biāo)測(cè)定：實(shí)驗(yàn)中觀察記錄小鼠的一般狀況,末次給藥 6小時(shí)后,摘眼球取血,處死解剖小鼠取胸腺、脾臟及肺臟,并稱胸腺及脾臟的質(zhì)量,計(jì)算胸腺指數(shù)、脾臟指數(shù)；用流式細(xì)胞儀檢測(cè) T 淋巴細(xì)胞亞群百分比即 CD4+T 淋巴細(xì)胞百分比、CD8+T 淋巴細(xì)胞百分比,計(jì)算 CD4/CD8

4、比值。酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)小鼠血清中IL-12、TNF-α含量,光鏡下觀察小鼠肺組織蘇木素-伊紅(HE)染色后病理學(xué)改變。
　　結(jié)果：
　　1 成功復(fù)制免疫低下肺部感染小鼠模型,各治療組可明顯改善小鼠的一般狀態(tài)。
　　2 對(duì)免疫低下肺部感染小鼠體重的影響：與模型組相比,除清肺培元顆粒低劑量組外,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均能一定程度的增加小鼠體重,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05

5、)。與 FLV 組相比,清肺培元顆粒高劑量組、AZT組、中西藥組、唐草片組均能一定程度的增加小鼠體重,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　3 對(duì)免疫低下肺部感染小鼠胸腺質(zhì)量、胸腺指數(shù)的影響：與模型組相比,正常組的胸腺質(zhì)量及胸腺指數(shù)較模型組數(shù)值高,除清肺培元顆粒低劑量組外,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組在一定程度上均能增加胸腺質(zhì)量及胸腺指數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與 FLV 組相比,清

6、肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均能一定程度的增加胸腺質(zhì)量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與 FLV組相比,AZT 組、清肺培元顆粒高劑量組、中西藥組均能一定程度的增加胸腺指數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　4 對(duì)免疫低下肺部感染小鼠脾臟質(zhì)量、脾臟指數(shù)的影響：與模型組相比,除清肺培元顆粒低劑量組外,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均能降低脾臟質(zhì)量、脾臟指數(shù),差異顯

7、著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。與FLV組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組、AZT組、中西藥組、唐草片組均能降低脾臟質(zhì)量、脾臟指數(shù),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與AZT組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒低劑量組及其他治療組降低脾臟質(zhì)量、脾臟指數(shù)的程度較低,差異顯著,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。
　　5 對(duì)免疫功能低下肺部感染小鼠T淋巴細(xì)胞的影響：①與模型組相比,除清肺培元顆粒低劑量組外,清肺培

8、元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均有升高 CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4 /CD8比值的作用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與AZT組相比,清肺培元顆粒低劑量組升高CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4/CD8比值的程度較AZT組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與FLV組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組、AZT組、中西藥組、唐草片組均能升高CD4+T淋巴細(xì)胞百分比、CD4 /CD8比值,差異有統(tǒng)

9、計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；②與模型組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均有降低CD8+T淋巴細(xì)胞百分比的作用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；其他各治療組間無明顯差異。與 FLV 組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組及其他治療組均能降低CD8+T淋巴細(xì)胞百分比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　6 對(duì)免疫功能低下肺部感染小鼠 IL-12 的影響：與模型組相比,除清肺培元顆粒低

10、劑量組外,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組均有升高IL-12的作用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與中西藥組相比,其余各治療組升高 IL-12程度較中西藥組低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。與FLV組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組、AZT組、中西藥組、唐草片組均能升高IL-12的含量,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　7 對(duì)免疫功能低下肺部感染小鼠TNF-α的影響：與模

11、型組相比,清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組以及其他各治療組TNF-α含量均下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與中西藥組相比,模型組 TNF-α含量高,清肺培元顆粒中劑量組、清肺培元顆粒低劑量組、AZT 組、唐草片組較中西藥組 TNF-α含量下降幅度低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
　　8 小鼠肺病理改變可見：模型組肺內(nèi)可見細(xì)支氣管上皮細(xì)胞出現(xiàn)纖毛倒伏、細(xì)胞變性壞死等損傷性改變,伴炎癥反應(yīng)；其周圍肺泡腔內(nèi)見

12、少量漿液、纖維素滲出及紅細(xì)胞漏出,肺泡壁明顯增厚,甚至肺泡完全閉塞,可見大量中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞滲出。各治療組病理學(xué)改變較模型組輕,其中以清肺培元顆粒高劑量組、清肺培元顆粒中劑量組、中西藥組改善明顯。
　　結(jié)論：
　　1 成功建立免疫低下肺部感染小鼠模型,用于觀察復(fù)方中藥對(duì)免疫功能低下肺部感染小鼠的影響。
　　2 清肺培元顆粒不僅能夠改善小鼠的一般癥狀,增加體重,也能使主要的免疫器官胸腺、脾臟的質(zhì)