姜黃素抑制肝癌細(xì)胞Bel7402、QGY7703生長(zhǎng)的相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的：觀察不同劑量的姜黃素在體外對(duì)肝癌細(xì)胞Bel7402、QGY7703生長(zhǎng)的影響，探討姜黃素抑制肝癌細(xì)胞增殖、促進(jìn)其凋亡的可能分子學(xué)機(jī)制。
　　方法：用不同濃度的姜黃素作用于體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞Bel7402和QGY770348 h后:MTT法檢測(cè)姜黃素對(duì)肝癌細(xì)胞體外增殖的抑制情況;FCM采用AnnexinV-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率;Western Blot檢測(cè)Bel7402、QGY7703細(xì)胞質(zhì)中β-catenin蛋

2、白含量的變化;RT-PCR法檢測(cè)肝癌細(xì)胞中c-myc、VEGF、cyclinD1 mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果： MTT實(shí)驗(yàn)顯示:經(jīng)濃度為5、10、20、40、80μmol/L的姜黃素作用48 h后，肝癌細(xì)胞Bel7402、QGY7703的增殖明顯受到抑制，抑制率與空白對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。藥物濃度越大，增殖抑制率越高，呈劑量依賴性(rB=0.96，P＜0.05; rQ=0.97，P＜0.05)。FCM分析顯示

3、:實(shí)驗(yàn)組肝癌細(xì)胞凋亡率均高于空白對(duì)照組(P＜0.05)，且隨著藥物濃度的增加，細(xì)胞凋亡率逐漸升高，呈劑量依賴性(rB=0.96，P＜0.05; rQ=0.99，P＜0.05)。Western Blot結(jié)果顯示:經(jīng)姜黃素作用48 h后的Bel7402和QGY7703細(xì)胞，其胞漿β-catenin蛋白含量低于空白對(duì)照組，除10μmol/L濃度組外，20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L濃度組與空白對(duì)照組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜

4、0.05)。藥物濃度越大，胞漿β-catenin蛋白含量越少，呈劑量依賴性（rB=-0.96，P＜0.05; rQ=-0.95，P＜0.05）。PCR結(jié)果顯示:經(jīng)姜黃素作用后的肝癌細(xì)胞，c-myc、VEGF、cyclinD1 mRNA表達(dá)量較空白對(duì)照組均有所減少，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，且呈劑量依賴性(rB=-0.99，-0.92，-0.93, P＜0.05; rQ=-0.94,-0.98,-0.98, P＜0.05)。