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文檔簡介
1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文急性白血病患者DNA甲基轉(zhuǎn)移酶基因的表達及其臨床意義姓名:喬淑凱申請學位級別:碩士專業(yè):內(nèi)科學指導教師:徐世榮2003.3.1中文摘要達及其與臨床預后之間的關系。同時進一步了解甲基化抑制劑對白血病細胞惡性克隆生長抑制的影響及其作用機制,為臨床治療白血病提供幫助。方法:本研究對象為72例成人急性白血病(acuteleukemia,AL)患者,其中急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia,AML)54
2、例,急性淋巴細胞白血病(acutelymphoblasticleukemia,ALL)18例。正常健康人20例作為對照。采用半定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(simiquantifyreversetranscriptionpolymerasechainreaction,RT—PCR)方法對AL患者和20例正常對照的骨髓進行DNMTI、DNMT3A、DNMT3B、P15、MDRl、PCNAmRNA水平的檢測。采用甲基化特異性PCR(MSP。PC
3、R)方法檢測56例AL患者和14例正常對照P15基因啟動子區(qū)域CpG島甲基化率。通過細胞培養(yǎng)的方法對白血病細胞株K562、HL60以及原代細胞進行傳代培養(yǎng),并用不同濃度的甲基化抑制劑5雜氮一2脫氧一胞苷(5aza2’deoxycytidine,5azaCdR)對其進行處理,然后于鏡下觀察細胞增殖狀況;用MTT法觀察細胞活性及生長狀況,并繪制生長曲線;用NBT還原實驗觀察HL60細胞的分化情況;用WrightGiemsa染色對各種細胞進行
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