山茱萸飲片指紋圖譜及血清化學(xué)的初步研究.pdf

1、本研究為2004年河南省重大科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目“中藥飲片加工炮制規(guī)范化研究”的子課題“山茱萸飲片加工炮制規(guī)范化研究”的一部分。主要是對(duì)山茱萸的臨床常用飲片規(guī)格山萸肉、酒萸肉的紫外譜線組、高效液相指紋圖譜進(jìn)行研究，以及血清化學(xué)的初步研究。內(nèi)容分為二大部分：山萸肉、酒萸肉飲片指紋圖譜的建立與比較、山茱萸炮制前后血清化學(xué)的初步研究。 目的：建立不同方法制山茱萸飲片紫外譜線組以及高效液相指紋圖譜，比較山茱萸炮制前后紫外圖譜最大吸收的變化；

2、同時(shí)對(duì)山茱萸HPLC指紋圖譜進(jìn)行相似度分析，比較山茱萸炮制前后指紋圖譜的變化，為山茱萸的規(guī)范化炮制奠定基礎(chǔ)；對(duì)山茱萸炮制前后含藥血清變化進(jìn)行初步研究，以期為以后山茱萸有效成份的研究進(jìn)行初步探討。 方法：通過系統(tǒng)查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)資料，對(duì)山茱萸在我省的藥源分布、化學(xué)成份、藥理作用進(jìn)行歸納總結(jié)，建立系統(tǒng)的化學(xué)成分研究方法：1、以紫外分光光度計(jì)測(cè)定山茱萸不同炮制品粉末的蒸餾水、無水乙醇、氯仿以及石油醚不同溶劑浸提液的紫外吸收，比較最大吸收

3、波長(zhǎng)，并通過同波長(zhǎng)、同濃度的最大吸收峰的高低來比較其有效成分相對(duì)含量；采用HPLC法對(duì)不同方法制酒萸肉飲片以及山茱萸飲片的高效液相指紋圖譜并對(duì)其進(jìn)行比較：過指紋圖譜處理軟件(Chromafinger 2005 beta 0.1軟件)對(duì)山茱萸指紋圖譜進(jìn)行相似度分析。2、將山萸肉炮制前后的樣品水煎液給大鼠灌胃，對(duì)含藥血清與空白血清的HPLC指紋圖譜進(jìn)行初步比較。 結(jié)果：1、山茱萸不同炮制品同種浸提液的最大紫外吸收處的波長(zhǎng)不同，而且同

4、種炮制品的不同浸提液的最大紫外吸收處的波長(zhǎng)也不同。常壓下酒蒸山茱萸最大紫外吸收處的吸收度最大，其次是加壓酒蒸，再次是生品；通過對(duì)山茱萸HPLC指紋圖譜進(jìn)行相似度分析表明：不同產(chǎn)地、不同批次、同一炮制方法和工藝的山茱萸飲片指紋圖譜相似度均大于0.9；山萸肉生品與酒萸肉飲片指紋圖譜有明顯差異；不同方法制酒萸肉飲片高效液相指紋圖譜相比沒有差異。不同產(chǎn)地的山萸肉飲片高效液相指紋圖譜中峰面積有一定差異。2、通過對(duì)大鼠含藥血清與空白血清的HPLC指

5、紋圖譜進(jìn)行比較結(jié)果表明：山茱萸吸收入血后，生品與制品血清色譜圖相比，有一些面積較小的色譜峰出現(xiàn)，可能是酒制后便于吸收的原因；生品與制品血清色譜圖與入血前色譜圖比較，多數(shù)色譜峰均未檢測(cè)到，可能是藥物成分在吸收入血過程中發(fā)生了變化，也可能和取血及處理方法有關(guān)。山茱萸炮制前后指紋圖譜和山萸肉及酒萸肉飲片入血后含藥血清指紋圖譜在保留時(shí)間為20min左右均檢測(cè)到一色譜峰，雖然入血后含藥血清指紋圖譜峰面積較入血前降低，但在空白血清和溶劑峰中未檢測(cè)到