轉(zhuǎn)LbDREB基因大青楊抗旱及耐鹽性分析.pdf

1、針對(duì)干旱頻繁出現(xiàn)、鹽堿化土地日益擴(kuò)大的趨勢(shì)，常規(guī)育種周期長(zhǎng)而不能滿足林業(yè)生產(chǎn)的需要，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育楊樹(shù)抗逆品種是林木分子育種的重要手段之一。本研究以3個(gè)轉(zhuǎn)LbDREB基因株系大青楊及野生型WT為材料，利用PEG6000模擬干旱脅迫處理，NaCl模擬鹽脅迫處理，調(diào)查脅迫條件下不同株系生長(zhǎng)、瞬時(shí)LbDREB基因表達(dá)量和生化指標(biāo)的變化。
　　主要研究結(jié)果如下:
　　1.LbDREB轉(zhuǎn)錄因子不經(jīng)過(guò)跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，直接參與抗逆反應(yīng)，Lb

2、DREB轉(zhuǎn)錄因子基因不是兩性基因，不穩(wěn)定，表現(xiàn)為親水性，其含有卷曲螺旋結(jié)構(gòu)，對(duì)植物體內(nèi)識(shí)別分子、調(diào)控代謝過(guò)程、膜通道轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程等生物學(xué)功能有著重要意義。
　　2.鹽脅迫和干旱脅迫下，轉(zhuǎn)基因大青楊較WT葉形表現(xiàn)更好，生物量向根部分配更多。
　　3.轉(zhuǎn)基因株系LbDREB基因表達(dá)比WT更強(qiáng)烈，WT脅迫期間變化穩(wěn)定;鹽脅迫下，轉(zhuǎn)基因株系Dr22和Dr2相對(duì)基因表達(dá)都呈先上升，后下降的趨勢(shì)，Dr8呈現(xiàn)不斷上升趨勢(shì)。干旱脅迫下，受測(cè)大青

3、楊所有株系相對(duì)基因表達(dá)都呈先上升，后迅速下降再上升的趨勢(shì)。
　　4.隨著鹽脅迫程度的增加，LbDREB基因表達(dá)量與SOD和POD變化趨勢(shì)一致，呈先上升后下降的趨勢(shì)，隨著PEG脅迫時(shí)間的增加，LbDREB基因表達(dá)量與SOD和POD變化趨勢(shì)一致，呈現(xiàn)先上升后下降再上升的趨勢(shì);轉(zhuǎn)基因株系較WT保護(hù)酶活性更強(qiáng)。
　　5.轉(zhuǎn)基因株系較WT脯氨酸含量積累增多;鹽脅迫下脯氨酸含量不穩(wěn)定，但Dr22仍顯著高于其他株系的脯氨酸含量，Dr22的

4、抗鹽性更為顯著。干旱脅迫下脯氨酸含量轉(zhuǎn)基因各株系基本呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，在96h時(shí)株系Dr2、Dr8、Dr22的脯氨酸含量達(dá)到最大值，并且均比WT高（株系Dr8、Dr22和Dr2脯氨酸含量分別是WT的6.9、11.4和6.6倍）。
　　6.鹽和干旱脅迫下，MDA含量均呈先上升后下降再上升的趨勢(shì)，轉(zhuǎn)基因株系較WT丙二醛積累降低;鹽脅迫時(shí)，WT株系MDA含量顯著比轉(zhuǎn)基因各株系高，抗鹽性能力WT＜Dr8＜Dr2＜Dr22。干旱脅迫時(shí)，轉(zhuǎn)基因株

5、系Dr2、Dr8、Dr22分別增加了1.24，1.17，1.39倍;而WT增加了1.54倍，抗旱性能力WT＜Dr22＜Dr2＜Dr8。
　　7.轉(zhuǎn)基因株系較WT相對(duì)電導(dǎo)率更低。鹽脅迫下，在96h時(shí)WT增幅最大(48.21％)，Dr22最小為(29.15％)。各株系抗鹽性Dr22＞Dr2＞Dr8＞W(wǎng)T。干旱脅迫下，在96h時(shí)WT增幅最大(57.56％)，Dr2最小為(22.36％)。各株系抗旱性Dr2＞Dr22＞Dr8＞W(wǎng)T。

6、>　　8.逆境脅迫下，WT株系持續(xù)失水，相對(duì)含水量不斷下降，轉(zhuǎn)基因株系保有比WT更高的含水量，對(duì)比發(fā)現(xiàn)Dr8=Dr22＞Dr2＞W(wǎng)T。
　　9.葉綠素和光化學(xué)能量轉(zhuǎn)化率下降較轉(zhuǎn)基因株系更慢;鹽脅迫下，各株系SPAD葉綠素含量浮動(dòng)變化小，且持續(xù)下降，轉(zhuǎn)基因株系Dr2，D22始終保持著很高的葉綠素含量，其中Dr22表現(xiàn)的抗鹽能力更強(qiáng)。鹽脅迫下，各株系的PSⅡ光化學(xué)能量轉(zhuǎn)化率不斷下降，但WT下降更為明顯，脅迫后發(fā)現(xiàn)Dr22＞Dr8＞Dr