樹突狀細胞與細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞共培養(yǎng)對白血病耐藥細胞殺傷作用的實驗研究.pdf

1、目的：多藥耐藥的發(fā)生是白血病化療失敗的主要原因。本文旨在研究利用P-170糖蛋白(P-gp)高表達的多藥耐藥(MDR)白血病K562/A02細胞凍融抗原沖擊的樹突狀細胞(DC)與同源細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞(CIK)共培養(yǎng)，觀察共培養(yǎng)細胞(K562/A02-DC-CIK、DC-CIK)的免疫表型的變化、增殖活性及其對多藥耐藥細胞株K562/A02殺傷作用的影響，證實以多藥耐藥為靶點的免疫治療的可行性并探討DC-CIK共育對免疫介導(dǎo)的腫瘤殺

2、傷效應(yīng)的影響。方法：提取健康人的骨髓單個核細胞(BMMNC)，常規(guī)誘導(dǎo)出DC及CIK細胞，將P-gp高表達的多藥耐藥白血病K562/A02細胞凍融物作為抗原沖擊的DC，與CIK細胞共培養(yǎng)作為實驗組(K562/A02凍融物-DC-CIK組)，抗原不沖擊的DC與CIK細胞共培養(yǎng)作為對照組(DC-CIK組)，以CIK及DC細胞單獨培養(yǎng)分別作為空白對照組1和空白對照組2。光鏡下觀察細胞形態(tài)，應(yīng)用流式細胞術(shù)分析細胞表型，MTT法檢測K562/A0

3、2凍融物-DC-CIK，DC-CIK,CIK細胞對MDR白血病株K562/A02細胞、敏感株K562細胞及人乳腺癌細胞系MCF7細胞株的殺傷活性。結(jié)果：K562/A02凍融物-DC-CIK組、DC-CIK組細胞增殖活性均大于CIK組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。K562/A02凍融物-DC-CIK組對K562/A02、K562細胞的殺傷活性在效靶比5∶1、10∶1、20∶1時分別為(42.9±0.67)％、(49.85±0.28)

4、％、(63.36±0.46)％和(23.56±0.43)％、(26.11±0.34)％、(34.46±0.35)％，均高于DC-CIK組及單純CIK組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；K562/A02凍融物-DC-CIK組對K562/A02的殺傷活性高于K562和MCF7(P＜0.05)。結(jié)論：DC與CIK共培養(yǎng)細胞是一種增殖活性和細胞毒活性高于CIK細胞的免疫活性細胞，而經(jīng)多藥耐藥白血病K562/A02凍融抗原沖擊的DC與CIK共培