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文檔簡介
1、目的：觀察缺血預(yù)適應(yīng)對在體大鼠急性心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及與自噬蛋白Beclin1與抗凋亡蛋白Bcl-2的可能關(guān)聯(lián),從而為缺血性心臟病的治療提供新思路。
方法：雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠24只,重量200g-250g,隨機(jī)平均分為假手術(shù)(Sham)組、缺血/再灌注(Ischemia-reperfusion,I/R)組、缺血預(yù)適應(yīng)(IschemicPreconditioning,IPC)組。IPC組在缺血
2、再灌注前給予短暫缺血5分鐘、再灌注5分鐘并循環(huán)3次,隨后結(jié)扎30分鐘,再灌120分鐘。應(yīng)用電子顯微鏡觀察心肌細(xì)胞自噬泡的發(fā)生,線粒體的形態(tài)學(xué)改變;Western blotting測定LC3-II和Beclin1蛋白的表達(dá);免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)檢測Beclin1和Bcl-2蛋白的結(jié)合情況;TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡。
結(jié)果：與I/R組相比,IPC組自噬泡數(shù)量增多,線粒體超微結(jié)構(gòu)損傷
3、減輕。LC3-II作為評價自噬強(qiáng)度的指標(biāo),IPC與I/R組相比,該值上調(diào)(P<0.05)。I/R組與S組、IPC組相比,Beclin 1與Bcl-2蛋白結(jié)合程度明顯降低(P<0.01);而這兩組之間差異無顯著性(P>0.05)。IPC組細(xì)胞凋亡率較I/R組明顯降低(P<0.01)。
結(jié)論：急性缺血再灌注可誘導(dǎo)心肌細(xì)胞自噬的發(fā)生,缺血預(yù)適應(yīng)可通過促進(jìn)Beclin1與Bcl-2的結(jié)合以減少再灌注階段起損傷心肌作用的Beclin 1
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