三七總皂苷影響大鼠肺纖維化及其CTGF表達(dá)的研究.pdf

1、目的：肺纖維化(pulmonaryfibrosis，PF)的發(fā)病率具有逐漸增多的趨勢(shì)，其發(fā)病機(jī)制尚不清楚。結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connective，tissuegrowthfactor，CTGF)是一種富含半胱氨酸的分泌性多肽，與皮膚、肝、腎等組織器官纖維化有著重要聯(lián)系，但在肺纖維化中的作用研究不多。肺纖維化傳統(tǒng)治療的主要藥物為糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑、抗纖維化制劑和部分活血化淤中藥，療效尚不理想。本研究采用博萊霉素誘導(dǎo)肺纖維化大鼠模型，觀(guān)

2、察CTGF及其mRNA的表達(dá)變化，以及CTGF與TGF-β1的關(guān)系；采用三七總皂苷干預(yù)和治療肺纖維化大鼠，并與川芎嗪、地塞米松進(jìn)行比較。旨在為闡明肺纖維化的發(fā)病機(jī)制，尋找治療肺纖維化的新方法提供理論依據(jù)。 方法：采用一次性氣管內(nèi)滴注博萊霉素制備肺纖維化大鼠模型。 肺纖維化早期干預(yù)：健康Wistar大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(CG1)、模型組(MG1)、川芎嗪組(TG1)、地塞米松組(DG1)、三七總皂苷組(PG1)。TG1、DG

3、1、PG1從造模后第一天開(kāi)始相應(yīng)的干預(yù)，分別于干預(yù)7、14、21、28天每組處死動(dòng)物6只，觀(guān)察肺組織羥脯氨酸(HyP)含量及肺組織病理學(xué)改變，采用免疫組化方法檢測(cè)肺組織TGF-β1和CTGF的蛋白表達(dá)，用原位雜交和RT-PCR法檢測(cè)CTGFmRNA表達(dá)。 肺纖維化進(jìn)展期治療：造模28天后的Wistar大鼠分為模型組(MG2)、川芎嗪組(TG2)、地塞米松組(DG2)、三七總皂苷大、中、小劑量組(PGH、PGM、PGL)，進(jìn)行相應(yīng)

4、的治療，治療30天每組處死動(dòng)物6只，觀(guān)察指標(biāo)同上。 結(jié)果： 1、MG1大鼠的肺組織病理形態(tài)學(xué)顯示典型的肺纖維化過(guò)程：第7天為明顯的急性炎癥改變；14天肺泡炎減輕，成纖維細(xì)胞增多；21天膠原纖維沉積進(jìn)一步增多；28天肺泡結(jié)構(gòu)破壞，肺泡間隔及部分肺泡腔被膠原和纖維蛋白占據(jù)。TGF-β1蛋白和CTGF的蛋白、mRNA表達(dá)于第7天達(dá)到高峰，后逐漸下降，呈持續(xù)表達(dá)狀態(tài)。 2、對(duì)肺纖維化大鼠早期干預(yù)后，PG1、TG1和DG1

5、大鼠的病理形態(tài)學(xué)仍有逐漸進(jìn)展的肺纖維化改變，但程度明顯輕于MG1。肺組織HyP含量及TGF-β1、CTGF表達(dá)趨勢(shì)與MG1相似，但均高于CG1而低于MG1(P＜0.01或P＜0.05)。 3、對(duì)進(jìn)展期肺纖維化大鼠治療后，MG2、DG2、PGL三組的肺纖維化程度進(jìn)一步加重，而PGH、PGM、TG2的肺組織病變明顯輕于MG2。MG2的TGF-β1呈持續(xù)較高水平表達(dá)狀態(tài)，DG2、PGL的表達(dá)弱于MG2(P＜0.05)，TG2、PGH、

6、PGM明顯弱于MG2(P＜0.01)。MG2、DG2的CTGF仍然持續(xù)較高水平表達(dá)，兩組相差不顯著，PGL的表達(dá)低于MG2(P＜0.05)，而TG2、PGH、PGM明顯低于MG2(P＜0.01)。 結(jié)論：1、一次性氣管內(nèi)滴注博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化大鼠模型穩(wěn)定可靠，較好地模擬臨床肺纖維化過(guò)程。 2、在博萊霉素誘導(dǎo)的肺纖維化大鼠肺組織中，CTGF始終呈高水平表達(dá)，說(shuō)明CTGF參與肺纖維化全過(guò)程。 3、與肺纖維化發(fā)生過(guò)