桑椹致腐微生物的分離鑒定及保鮮方法.pdf

1、桑椹是?？浦参锷＃∕orus alba L.）的果實，是一種傳統(tǒng)的保健果品。桑椹營養(yǎng)價值豐富，富含多種維生素、礦物質(zhì)、氨基酸及功能活性物質(zhì)，具有增強人體免疫力，促進造血功能，降血糖，抗衰老等功效。但桑椹柔軟多汁，表皮極薄，易腐爛，且成熟期極短，給桑椹的貯藏、運輸和銷售帶來了極大的困難。此外，被微生物侵染的桑椹還可能導致食源性疾病，極大地降低了桑椹的食用價值。目前，國內(nèi)外水果保鮮的方法主要采用化學保鮮和物理保鮮，化學藥劑容易導致藥物殘留危

2、害健康，物理保鮮成本昂貴，不利于大規(guī)模推廣。為探討桑椹保鮮的有效方法，本論文研究了導致桑椹致腐的主要微生物，桑椹低溫冷藏保鮮及1-MCP和ClO2結(jié)合的氣體保鮮方法，以其為桑椹保鮮技術(shù)的應(yīng)用提供理論依據(jù)。取得如下研究結(jié)果：
　　1.桑椹致腐菌的分離鑒定。分別采用含纖維素和果膠的篩選培養(yǎng)基，從霉變的桑椹表面篩選出數(shù)株致腐菌。采用DNS法和考馬斯亮藍法，測定所篩選出的致腐菌的半乳糖醛酸酶和纖維素酶的比活力，依據(jù)兩種酶比活力的大小，確定

3、所選菌株GA和GE為主要致腐菌。結(jié)合形態(tài)學觀察和18SrRNA基因的分子鑒定，最終確定 GA為核盤菌屬(Sclerotinia Sclerotiorum)，GenBank登錄號為KJ522780；GE為鏈格孢屬(Alternaria sp.)， GenBank登錄號為KJ489375。這兩種致腐菌適宜生長溫度都介于25至30℃之間。
　　2.桑椹致腐拮抗菌的分離與鑒定。以完好健康的桑椹為材料，采用濃度梯度稀釋法，分離純化出數(shù)株酵母

4、菌。通過與上述分離的核盤菌屬和鏈格孢屬菌株共培養(yǎng)試驗，篩選到一株對兩種致腐菌具有抗性的紅色酵母菌Y1。形態(tài)觀察及保守基因5.8SrRNA基因分子鑒定表明，所分離的紅色酵母菌Y1為鎖擲酵母屬（Sporidiobolus pararoseus），GenBank登錄號為KJ569246。該酵母菌適宜生長溫度在30℃左右。
　　3.低溫冷藏對桑椹保鮮的影響。比較了在低溫（3℃）和室溫（25℃）條件下，桑椹感官及生理品質(zhì)的變化。結(jié)果顯示，桑

5、椹在室溫下存放二天，果柄褐變萎蔫，果實松軟，氣味較淡，有酸腐味；至第四天已全部霉變，無任何食用價值。低溫下保存一周，果實色澤仍保持鮮紅有光澤，果實口感無明顯變化，果柄仍為青綠色。低溫環(huán)境下，桑椹可溶性總糖、維生素 C、可滴定酸的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性等都維持在較高的水平，丙二醛含量較低，說明低溫能有效延緩果實的呼吸作用，維持果實的品質(zhì)。
　　4.1-MCP和ClO2結(jié)合處理對桑椹保鮮的影響。研究結(jié)果表明，1 g/m3的

6、1-MCP單獨處理能顯著延緩果實衰老和感官品質(zhì)，20 g/m3以下的ClO2單獨處理對桑椹具有一定的保鮮效果。為篩選1-MCP和ClO2結(jié)合處理的最優(yōu)保鮮條件，試驗設(shè)計了1-MCP和ClO2的復合處理組合。結(jié)果顯示，1 g/m31-MCP結(jié)合12 g/m3 ClO2處理的桑椹果實霉變率最低，至第三天，果實仍飽滿鮮亮，果柄鮮綠，而對照組在第二天幾乎全部霉變、無食用價值；生理品質(zhì)研究表明，1-MCP和ClO2復合處理能有效地維持桑椹中Vc、