三種單基因遺傳性內(nèi)分泌疾病的分子遺傳學(xué)研究.pdf

1、目的:對所收集的21羥化酶缺陷癥、17α-羥化酶缺陷癥及甲狀腺激素抵抗綜合征患者及其家系成員進(jìn)行基因篩查，并分析基因型與臨床表型之間的相關(guān)性，從分子遺傳學(xué)角度深入探討疾病的發(fā)病機(jī)制。
　　方法:收集21羥化酶缺陷癥（3例）、17α-羥化酶缺陷癥（2例）及甲狀腺激素抵抗綜合征（1例）三種較為少見的單基因遺傳性內(nèi)分泌疾病共4個(gè)家系27名成員的臨床資料、基礎(chǔ)激素測定和影像學(xué)檢查結(jié)果，抽提外周血基因組DNA，PCR分別擴(kuò)增CYP21 A2

2、編碼區(qū)全部序列、CYP17A1的8個(gè)外顯子、TRβ基因1-10外顯子，PCR產(chǎn)物測序檢測突變位點(diǎn)，對于雜合突變，采用亞克隆方法進(jìn)一步明確。
　　結(jié)果:測序結(jié)果顯示:1.21-OHD家系1中先證者內(nèi)含子B上2333位點(diǎn)C→A，同時(shí)由于真假基因融合，導(dǎo)致CYP21A2基因編碼區(qū)第1外顯子1793T→C(L39L)，1813T→C(L45L)，1817T→C(Y47H)，患者父母及弟弟第1外顯子相應(yīng)位點(diǎn)未見突變;家系2中先證者及其妹妹C

3、YP21A2基因編碼區(qū)第4外顯子第172位密碼子處存在純合突變:ATC→AAC，導(dǎo)致Ile→Asn?；颊吒改傅?外顯子上編碼第172位氨基酸的密碼子是ATC和AAC，為雜合突變。2.17α-OHD家系中先證者及其“大姐”CYP17A1第6外顯子發(fā)生TAC→AA的錯(cuò)義突變和移碼突變，提前產(chǎn)生一終止密碼子(418TGA)，同時(shí)患者父母和同父異母的兩個(gè)弟弟經(jīng)亞克隆證實(shí)為雜合突變。3.THRS家系中先證者及母親TRβ基因第10外顯子1642C→