膳食與大鼠脂肪組織AMPK表達及肥胖的關(guān)系.pdf

1、目的：研究不同膳食模式對大鼠脂肪組織腺苷酸激活蛋白激酶（AMPK）表達的影響，以揭示飲食影響肥胖發(fā)生的可能機制，為預防肥胖提供切實可行的依據(jù)。 方法：雄性SD大鼠36只，初始體重160～170g。 ①購入大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1w后，隨機選取9只喂以基礎(chǔ)飼料作為對照組（CF），27只喂以高脂飼料15w后，根據(jù)對照組體重將其分為飲食誘導肥胖大鼠（DIO，14只）和飲食誘導肥胖抵抗大鼠（DIO-R，7只）。 ②將DIO組再隨

2、機分為2組，1組改喂基礎(chǔ)低脂飼料（DIO-HF/LF，7只），另一組繼續(xù)喂以高脂飼料（DIO-HF，7只），CF及DIO-R大鼠維持原飼料，繼續(xù)喂養(yǎng)8w。整個23w的喂養(yǎng)期間每日觀察大鼠一般情況，記錄給食量和撒食量，計算進食量，每周稱體重。 ③分別于0w、15w末和23w末過夜禁食10h后，于次晨采尾血（0w、15w末）或斷頭取血（23w末），分離血漿，置‐20℃冰箱保存，以備空腹血糖、血脂和胰島素的測定。 ④分離大鼠腎

3、周脂肪組織，迅速置液氮中凍存，以備RNA抽提，再分離睪周、腰周脂肪組織，稱重。 ⑤用RT-PCR法檢測腎周脂肪組織AMPKα1和AMPKα2 mRNA表達水平，免疫印跡法檢測AMPKα蛋白水平。 結(jié)果：高脂飲食誘導肥胖（DIO）大鼠體重、熱能攝入量、脂肪濕重、脂體比、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、胰島素（FINS）、空腹血糖（FBG）、空腹胰島素水平/空腹血糖水平（I/G）均顯著高

4、于CF和 DIO-R組大鼠（P<0.05），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）顯著低于CF組（P<0.05）；DIO-R大鼠與 CF組相比，除FBG、LDL-C顯著增高、HDL-C顯著降低外（P<0.05），其余指標均無顯著性差異（P>0.05）。低脂膳食干預后，DIO-HF/LF組大鼠體重、脂肪濕重、脂體比、食物和熱能攝入量、TC、LDL-C、FBG、FINS、I/G均顯著低于DIO-HF組（P<0.05），HDL-C顯著高于DIO-H

5、F組（P<0.05）；DIO-R組與CF組相比，除FBG顯著增高、HDL-C顯著降低外（P<0.05），其余指標均無顯著性差異（P>0.05）；DIO-HF組大鼠熱能攝入量、TC、TG、LDL-C、FINS及I/G 顯著高于 DIO-R組大鼠（P<0.05）。DIO-HF組大鼠腎周脂肪組織的AMPKα2 mRNA和AMPKα蛋白表達水平顯著低于CF、DIO-HF/LF及DIO-R組（P<0.05），其余三組之間無顯著性差異（P>0.05

6、）；四組間AMPKα1 mRNA表達均無顯著性差異（P>0.05）。 結(jié)論：含熱量19.33kJ/g的高脂飼料對SD大鼠具有致肥胖作用，可導致大鼠體重增加、脂肪蓄積和血脂代謝異常，但同種系、同性別大鼠對高脂飲食誘導的肥胖易感性存在顯著的個體差異；對肥胖大鼠改用熱量13.77kJ/g的低脂膳食喂養(yǎng)可降低肥胖大鼠的體重、脂肪蓄積和血脂代謝異常。長期高脂膳食條件下，肥胖易感大鼠腎周脂肪組織 AMPKα2 mRNA和AMPKα蛋白表達下

7、調(diào)，熱能攝入量增多，體重增加，脂肪蓄積，而肥胖抵抗大鼠AMPKα2 mRNA和AMPKα蛋白表達、熱能攝入量、體重、脂肪濕重相對穩(wěn)定，且肥胖易感大鼠食用高脂飼料肥胖后改用基礎(chǔ)飼料，AMPKα表達增加、體重、熱能攝入量、脂肪濕重減少，提示腎周脂肪組織中AMPKα的正常表達可避免能量過剩和肥胖的發(fā)生，其中AMPKα2具有重要作用。 創(chuàng)新點：AMPK是新近發(fā)現(xiàn)的一種蛋白激酶，它在維持能量平衡方面起著至關(guān)重要的作用。目前國內(nèi)外對AMPK