骨橋蛋白在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是首先由Senger于1979年作為一種與惡性轉(zhuǎn)化有關(guān)的磷酸化糖蛋白提取的，是骨骼和牙齒礦化細(xì)胞外基質(zhì)的主要組成成分。它廣泛分布于人體組織中且具有多種功能，它在T淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞、骨細(xì)胞、巨嗜細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及腫瘤細(xì)胞中都有較高表達(dá)；在骨組織的礦化與重建、動(dòng)脈硬化、抗感染、免疫調(diào)節(jié)、缺血再灌注損傷等過程中發(fā)揮重要的作用。近年來，OPN與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，特別是它與腫瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系日益引起人們的關(guān)注。

2、大量研究表明，多種腫瘤細(xì)胞在體內(nèi)、外均能產(chǎn)生OPN，在不同的惡性腫瘤轉(zhuǎn)移形成過程中發(fā)揮重要作用。近來的資料顯示，在部分腫瘤病人的血清中也以較高水平存在，在有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤組織中其表達(dá)更高，故有人將OPN稱為“腫瘤相關(guān)基因”或“轉(zhuǎn)移基因”。目前，對OPN在膀胱移行細(xì)胞癌(BTCC)中表達(dá)情況了解尚少。本研究擬探討不同病理分級(jí)、臨床分期的膀胱移行細(xì)胞癌組織中OPN的表達(dá)情況，并結(jié)合患者生存資料，對OPN表達(dá)與膀胱移行細(xì)胞癌預(yù)后進(jìn)行分析研究，

3、為OPN對膀胱移行細(xì)胞癌的預(yù)后判斷及治療靶點(diǎn)的選擇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法和結(jié)果總結(jié)如下： 1.HE染色篩選標(biāo)本：(1)、確定正常組織標(biāo)本無炎癥、癌變等病理改變；(2)、結(jié)合臨床資料根據(jù)WHO及UICC-TNM標(biāo)準(zhǔn)對腫瘤組織分別進(jìn)行分級(jí)和分期。 2.通過免疫組化SP法觀察正常膀胱組織及膀胱移行細(xì)胞癌中OPN的表達(dá)情況。每批染色均設(shè)立以用PBS緩沖液代替一抗作陰性對照，用已知的OPN染色陽性的成骨肉瘤組織切片做陽性對照。OP

4、N定位于細(xì)胞漿，陽性染色指顯微鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)具有清晰可見的、定位準(zhǔn)確的黃色顆粒，而且背景清晰。發(fā)現(xiàn)在12例正常膀胱組織中，11例(96.7％)為陰性，1例(3.3％)為弱陽性；45例膀胱移行細(xì)胞癌中21例(46.7％)為強(qiáng)陽性，14例(31.1％)為中等陽性，7例(15.5％)為弱陽性，3例(6.7％)為陰性。 3.通過門診復(fù)查、書信或電話方式對1995年1月-2000年1月期間就診大坪醫(yī)院病理診斷為膀胱移行細(xì)胞癌的患者進(jìn)行隨訪

5、。生存期白手術(shù)當(dāng)日開始，到2007年1月止。生存期計(jì)算以月為單位，未滿整月則大于或等于15天計(jì)一月，小于15天則不計(jì)，隨訪期限為12～84月。45例膀胱移行細(xì)胞癌患者全部進(jìn)行隨訪，隨訪率100.00％。5年內(nèi)死亡人數(shù)11例，其中OPN高表達(dá)者10例。 4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理。OPN在膀胱腫瘤組織與正常膀胱組織中表達(dá)強(qiáng)度的差異用頻數(shù)表等級(jí)資料兩樣本秩和檢驗(yàn)；OPN高表達(dá)率與腫瘤臨床分期間

6、比較用X2檢驗(yàn)；病理三分級(jí)的OPN高表達(dá)率的趨勢性檢驗(yàn)用cochran趨勢性X2檢驗(yàn)；OPN高表達(dá)率與腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移間比較用頻數(shù)表等級(jí)資料兩樣本秩和檢驗(yàn)。隨訪資料生存分析采用Kaplan-meier曲線分析法，用Log-rank檢驗(yàn)判斷差異性。以P＜0.05為顯著差異，P＜0.01為非常顯著差異。OPN在膀胱移行細(xì)胞癌中的表達(dá)與正常膀胱組織相比，具有非常顯著的差異(P＜0.01)；隨病理分級(jí)的增加表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.01)；隨臨床分期增加

7、表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.05)。復(fù)發(fā)膀胱移行細(xì)胞癌OPN的高表達(dá)率明顯高于初發(fā)膀胱移行細(xì)胞癌OPN的高表達(dá)率(P＜0.01)。發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的膀胱移行細(xì)胞癌OPN的高表達(dá)率明顯高于未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的膀胱移行細(xì)胞癌OPN的高表達(dá)率(P＜0.01)。Kaplan-meier曲線分析OPN高表達(dá)組患者2、3、5年生存率分別為97.14％、91.43％、71.43％，OPN低表達(dá)組患者2、3、5年生存率分別為100.00％、100.00％、90.00％。

8、Log-rank檢驗(yàn)顯示：膀胱移行細(xì)胞癌患者中OPN高表達(dá)組術(shù)后生存率低于OPN低表達(dá)組(差異分別為P＜0.05，P＜0.05和P＜0.01)。 結(jié)論：OPN是膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞中具有相對特異性表達(dá)的蛋白，OPN表達(dá)強(qiáng)度同腫瘤分級(jí)、分期、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移、5年生存率有密切關(guān)系，其表達(dá)增強(qiáng)可能與多種致瘤因素共同參與了膀胱移行細(xì)胞癌的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)；OPN表達(dá)可作為預(yù)測膀胱移行細(xì)胞癌生物行為及預(yù)后的指標(biāo)，也有望成為靶點(diǎn)治療膀胱移行細(xì)胞癌的