我國(guó)不同人群人芽囊原蟲(chóng)感染情況調(diào)查與分子流行病學(xué)研究.pdf

1、人芽囊原蟲(chóng)是一種常見(jiàn)的寄生于人體腸道的寄生物，在世界范圍內(nèi)廣泛分布。但是，關(guān)于人芽囊原蟲(chóng)生物學(xué)特征的諸多方面，包括分類(lèi)學(xué)地位、物種劃分、生活史和傳播模式等尚未闡明。甚至對(duì)于人芽囊原蟲(chóng)在人體的感染情況和地理分布也缺乏了解，原因在于人類(lèi)糞便中排出的人芽囊原蟲(chóng)蟲(chóng)體較小且形態(tài)多樣，因此，流行病學(xué)調(diào)查常用的檢查方法包括直接涂片法、甲醛-乙醚沉淀法和固定染色法等均被認(rèn)為是敏感性較低的檢查方法。近年來(lái)，研究者推薦使用體外培養(yǎng)法作為人芽囊原蟲(chóng)流行病學(xué)調(diào)

2、查的檢查手段。我國(guó)對(duì)人芽囊原蟲(chóng)的研究較少，且流行病學(xué)調(diào)查時(shí)多采用直接涂片法，因此，普遍認(rèn)為，我國(guó)各地人芽囊原蟲(chóng)的人體感染率可能被嚴(yán)重低估。目前，對(duì)人芽囊原蟲(chóng)基因多態(tài)性的研究已成為該領(lǐng)域的熱點(diǎn)問(wèn)題，國(guó)外研究者運(yùn)用不同的手段揭示了人芽囊原蟲(chóng)分離株存在著廣泛的基因多態(tài)性，并嘗試對(duì)基因多態(tài)性與生物學(xué)特性之間的關(guān)系進(jìn)行探討，但我國(guó)對(duì)該領(lǐng)域的研究甚少。 本研究首先用體外培養(yǎng)法作為流行病學(xué)調(diào)查手段對(duì)不同人群進(jìn)行了橫斷面調(diào)查，以了解不同人群的人

3、芽囊原蟲(chóng)感染率；然后運(yùn)用特異性STS(測(cè)序標(biāo)簽位點(diǎn)，sequenced-tagged sites)引物PCR．?dāng)U增的方法分析來(lái)自不同人群的人芽囊原蟲(chóng)分離株的基因多態(tài)性，了解各調(diào)查人群基因型的分布；最后對(duì)其中一個(gè)人群進(jìn)行了詳細(xì)的問(wèn)卷調(diào)查，分析影響人芽囊原蟲(chóng)及不同基因型感染的因素，初步探討人芽囊原蟲(chóng)不同基因型與生物學(xué)特性間的關(guān)系。本研究的調(diào)查人群分別來(lái)自：云南省大理白族自治州洱源縣居民、西雙版納傣族自治州勐?？h居民、上海市徐匯區(qū)居民和青浦區(qū)

4、居民、浙江省溫州市永嘉縣人民醫(yī)院病人。 結(jié)果表明，所研究的各人群人芽囊原蟲(chóng)的感染率有所不同，徐匯調(diào)查人群感染率最低，勐海最高。徐匯、青浦、永嘉、洱源和勐海所調(diào)查人群人芽囊原蟲(chóng)感染率分別為1.9％、3.2％、5.9％、18.4％和32.6％，均高于既往對(duì)鄰近地區(qū)報(bào)告的感染率。在流行程度不同的地區(qū)，人芽囊原蟲(chóng)感染的年齡、性別分布特征有所不同。在感染率較高的洱源和勐海，女性感染率略高于男性，而在感染率較低的徐匯、青浦和永嘉，男性感染率

5、略高于女性。在年齡分布上，發(fā)現(xiàn)人芽囊原蟲(chóng)感染率與年齡的關(guān)系呈現(xiàn)“峰值位移”現(xiàn)象，即：感染率越高的地區(qū)，感染率高峰出現(xiàn)中國(guó)疾病預(yù)防控制中心寄生蟲(chóng)病預(yù)防控制所在越低的年齡組，而感染率越低的地區(qū)感染率高峰出現(xiàn)在越高的年齡組。在洱源和勐海感染率最高的是10．19歲年齡組，而在徐匯、青浦和永嘉，感染率以60歲及以上年齡組最高。民族分布上，洱源縣調(diào)查人群中，白族居民感染率顯著高于漢族居民。各人群共查見(jiàn)192名人芽囊原蟲(chóng)感染者，對(duì)來(lái)自每位感染者的分離

6、株的基因組DNA進(jìn)行STS-PCR分析，結(jié)果表明，我國(guó)人芽囊原蟲(chóng)分離株存在著廣泛的基因多態(tài)性。本研究共得到5個(gè)已知基因型(subtype 1、2、3、4、6)和1個(gè)新基因型，各調(diào)查人群間基因型的分布無(wú)顯著性差異。所有基因型當(dāng)中，subtype 3所占比重最大，其次是subtype 1。對(duì)照國(guó)內(nèi)外既往對(duì)人芽囊原蟲(chóng)基因多態(tài)性的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，各個(gè)國(guó)家都是以subtype 3占優(yōu)勢(shì)，但其它幾型所占比重有所不同，提示各基因型的流行特征之間可能存在

7、差異。本研究結(jié)果顯示，與國(guó)外的研究結(jié)果相比，我國(guó)兩個(gè)基因型混合感染所占比例較大。本研究未發(fā)現(xiàn)人芽囊原蟲(chóng)基因型分布的性別差異。另外，本研究發(fā)現(xiàn)，來(lái)自同一個(gè)家庭的成員可感染不同基因型的蟲(chóng)株。 對(duì)勐海縣弄養(yǎng)村村民的橫斷面調(diào)查結(jié)果表明，當(dāng)?shù)丶纳x(chóng)多重感染現(xiàn)象普遍存在，其中，鉤蟲(chóng)、結(jié)腸內(nèi)阿米巴和微小內(nèi)蜒阿米巴感染與人芽囊原蟲(chóng)呈正相關(guān)關(guān)系。問(wèn)卷調(diào)查結(jié)果表明，飲用生水和飼養(yǎng)豬與人芽囊原蟲(chóng)感染呈正相關(guān)關(guān)系，是感染的危險(xiǎn)因素，而生食豬肉與感染呈負(fù)

8、相關(guān)。分別研究不同基因型與各個(gè)因素間的關(guān)系時(shí)發(fā)現(xiàn)，在寄生蟲(chóng)多重感染現(xiàn)象中，結(jié)腸內(nèi)阿米巴感染僅與人芽囊原蟲(chóng)subtype 1感染呈正相關(guān)，而鉤蟲(chóng)感染和微小內(nèi)蜒阿米巴感染與subtype 3感染呈正相關(guān)；生食水生植物(當(dāng)?shù)刂饕撬鄄耍环N野菜)是subtype 1感染的危險(xiǎn)因素，而飲用生水僅是subtype 3感染的危險(xiǎn)因素。提示人芽囊原蟲(chóng)不同的基因型在外部生存的微環(huán)境、傳播途徑等方面可能存在著差異。 本研究表明，我國(guó)人芽囊原蟲(chóng)感