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1、中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文CUEDC2通過抑制IKK復(fù)合體磷酸化下調(diào)NF-κB通路姓名：李慧艷申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：張學(xué)敏20070510擒 要C U E D C 2 通過抑制I K K 復(fù)合體磷酸化下調(diào)N F _ l c B 通路摘 要C U E D C 2 目前是一個功能未知的蛋白質(zhì)，通過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)，C U E D C 2 包含一個C U E 結(jié)構(gòu)域。C U E 是一個非常小的中度保守的結(jié)

2、構(gòu)域，大約包含4 0 個氨基酸，預(yù)測它能和泛素結(jié)合，既能識別單泛素化又能識別多泛素化，目前發(fā)現(xiàn)它存在各種真核蛋白質(zhì)中。最近，我們實驗室發(fā)現(xiàn)C U E D C 2 能夠和孕激素受體結(jié)合，促進(jìn)孕激素誘導(dǎo)的受體的泛素化和降解( 張佩景等， E M B O J r ．) ，并抑制乳腺癌細(xì)胞的生長，這就為C U E D C 2 在乳腺癌增殖過程中的作用提供了重要的線索。本文為進(jìn)一步揭示C U E D C 2 的功能，在應(yīng)用酵母雙雜交技術(shù)篩選與C

3、U E D C 2 相互作用蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)上，對其功能尤其是在N 陬B 通路中的作用進(jìn)行了更為深入的研究。我們通過研究發(fā)現(xiàn)一個未知功能的蛋白C U E D C 2 ( c U ED o m a i nC o n t a i n i n g 2 )能夠結(jié)合I K K a 和I K K B ，并且能夠通過使I K K a 和I K K p 去磷酸化而抑制N F - I c 信號通路。在細(xì)胞因子誘導(dǎo)的N F —l c B 通路激活中，I r B

4、 激酶I K K a 和I K K p 的激活是關(guān)鍵的步驟。因此，對I K K 復(fù)合體磷酸化的精確調(diào)控是N F - K B 通路信號傳導(dǎo)的重要組成部分。利用s i R N A 抑制內(nèi)源C U E D C 2 表達(dá)導(dǎo)致T N F 誘導(dǎo)的N F - l ( B 轉(zhuǎn)錄活性增加，過表達(dá)C U E D C 2 增加了細(xì)胞對凋亡信號如T N F 誘導(dǎo)的凋亡。我們還發(fā)現(xiàn)C U E D C 2 與蛋白磷酸酶1 ( P P I ) 的調(diào)節(jié)亞基生長抑制和D

5、 N A 損傷蛋白3 4 ( G A D D 3 4 ) 存在相互作用。此外，我們發(fā)現(xiàn)C U E D C 2 對N F l c B 信號通路的抑制是由I K K —C U E D C 2 - G A D D 3 4 相互作用介導(dǎo)的。s i R N A 抑制內(nèi)源C U E D C 2 的實驗證明C U E D C 2 對于I K K —C U E D C 2 - G A D D 3 4復(fù)合體的形成是必須的，并且作為招募蛋白使I K K 去