免疫抑制對大鼠坐骨神經損傷修復后神經再生的實驗研究.pdf

1、目的：觀察環(huán)磷酰胺對大鼠坐骨神經損傷修復后坐骨神經內Th1/Th2細胞因子的變化,進一步探討環(huán)磷酰胺影響神經再生的機制,為臨床上制定有效的治療方案提供實驗依據。
　　 方法：將96只Wistar大鼠隨機分為環(huán)磷酰胺實驗組(n=30),生理鹽水對照組(n=30),假手術組(n=30)和正常對照組(n=6),環(huán)磷酰胺實驗組及生理鹽水對照組橫斷右側坐骨神經后,行神經外膜端端吻合;假手術組僅游離出坐骨神經,然后關閉切口;正常對照組不做任

2、何處理。術后即日環(huán)磷酰胺實驗組腹腔注射環(huán)磷酰胺(15mg/kg.d),連續(xù)2周,生理鹽水對照組、假手術組及正常組大鼠腹腔注射同等體積生理鹽水,連續(xù)2周。于術后1、2、4、8、12周時采用坐骨神經功能指數(shù),腓腸肌濕重恢復率及組織形態(tài)學評價坐骨神經再生及功能恢復情況,并采用免疫組化方法檢測神經組織中干擾素γ(INF-γ)、白介素4(IL-4)和白介素10(IL-10)的表達。
　　 結果：(1)神經再生評價:術后8,12周時環(huán)磷酰胺

3、實驗組坐骨神經功能指數(shù),腓腸肌濕重恢復率結果均優(yōu)于生理鹽水對照組,差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。形態(tài)學觀察,環(huán)磷酰胺實驗組神經損傷后再生神經軸突直徑、數(shù)量及髓鞘厚度均優(yōu)于生理鹽水對照組。(2)免疫組化結果:①假手術組和正常對照組各時間點坐骨神經內無INF-γ和IL-10陽性表達,而在生理鹽水對照組和環(huán)磷酰胺實驗組坐骨神經內有陽性表達;②各時間點各組動物坐骨神經內均無IL-4陽性表達;③生理鹽水對照組損傷修復后的坐骨神經內INF-γ的

4、表達高峰出現(xiàn)在術后1周,術后2周時表達明顯減少,4周后無陽性表達;而環(huán)磷酰胺實驗組INF-γ表達高峰出現(xiàn)在術后2周時,術后第4周仍有少量陽性表達,8周后無陽性表達;術后1、2、4周兩組實驗動物坐骨神經內INF-γ比較,差異顯著。④生理鹽水對照組損傷修復后的坐骨神經內IL-10的陽性表達,峰值出現(xiàn)在術后1周,逐漸降低,術后8周時仍有少量陽性表達;而術后1、2、4周環(huán)磷酰胺實驗組坐骨神經內IL-10的表達較生理鹽水對照組減少,差異有統(tǒng)計學意