Vγ9Vδ2T細(xì)胞及其趨化因子受體CCR2、CCR5、CXCR3在結(jié)核性胸腔積液中的作用機(jī)制研究.pdf

1、[目的]
　　 本課題通過(guò)檢測(cè)結(jié)核性胸腔積液患者血液及胸腔積液中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(CCL2)、γ干擾素誘導(dǎo)蛋白10(CXCL10)的含量，并檢測(cè)CCL2、CCL5、CXCL10 mRNA的相對(duì)表達(dá)量，及CCL2的受體CCR2、CCL5的受體CCR5、CXCL10的受體CXCR3在Vγ9Vδ2T細(xì)胞表面所占比例，探討Vγ9Vδ2T細(xì)胞與趨化因子、趨化因子受體在結(jié)核性胸腔積液的作用及機(jī)制。
　　 [方法]
　　

2、1、實(shí)驗(yàn)分組:將健康人作為正常組;結(jié)核性胸腔積液患者作為結(jié)核組。
　　 2、采用ELISA方法檢測(cè)血液及胸腔積液中CCL2、CXCL10的含量。
　　 3、采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法分別檢測(cè)胸腔積液及血液?jiǎn)蝹€(gè)核細(xì)胞CCL2、CCL5、CXCL10的mRNA相對(duì)表達(dá)量。
　　 4、采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)胸腔積液及血液的Vγ9Vδ2T細(xì)胞表面CCR2、CCR5、CXCR3的表達(dá)。
　　 5、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以Excel

3、軟件建立數(shù)據(jù)庫(kù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。各組數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，偏態(tài)分布資料以中位數(shù)（下四分位數(shù)～上四分位數(shù)）表示。兩組樣本比較采用獨(dú)立樣本f檢驗(yàn)，配對(duì)樣本比較采用配對(duì)樣本f檢驗(yàn);偏態(tài)分布采用非參數(shù)檢驗(yàn);比較CCL2、CXCL10與Vγ9Vδ2T細(xì)胞數(shù)量的相關(guān)性采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析。P＜0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 [結(jié)果]
　　 1、結(jié)核組血清中CXCL10含量明顯高于正

4、常組(P＜0.05);結(jié)核組胸腔積液中CXCL10含量高于組內(nèi)血清（P＜0.05）。
　　 2、結(jié)核組血清中CCL2含量高于正常組(P＜0.05)。結(jié)核組胸腔積液中CCL2含量高于組內(nèi)血清(P＜0.05)。
　　 3、結(jié)核組血液中單個(gè)核細(xì)胞CCL2的mRNA相對(duì)表達(dá)量高于正常組(P＜0.05)，結(jié)核組胸腔積液中單個(gè)核細(xì)胞CCL2的mRNA相對(duì)表達(dá)量高于組內(nèi)血液(P＜0.05)。
　　 4、結(jié)核組血液中單個(gè)核細(xì)胞C

5、CL5的mRNA相對(duì)表達(dá)量與正常組比較無(wú)明顯差異。
　　 5、兩組血液中Vγ9Vδ2T細(xì)胞表面CCR2、CXCR3、CCR5的表達(dá)無(wú)顯著性差異;結(jié)核組胸腔積液中Vγ9Vδ2T細(xì)胞表面的CCR2高于組內(nèi)血液(P＜0.05)。
　　 6、結(jié)核組血清中，CCL2的含量與血液中Vγ9Vδ2T細(xì)胞數(shù)量呈中度正相關(guān)（P＜0.05），CXCL10的含量與Vγ9Vδ2T細(xì)胞數(shù)量呈高度正相關(guān)(P＜0.05);結(jié)核組胸腔積液中，CCL2的含

6、量與Vγ9Vδ2T細(xì)胞數(shù)量呈高度正相關(guān)(P＜0.05)，CXCL10的含量與Vγ9Vδ2T細(xì)胞數(shù)量呈高度正相關(guān)(P＜0.05)。
　　 [結(jié)論]
　　 1、結(jié)核組血清中CCL2、CXCL10含量均明顯高于正常組(P＜0.05)，對(duì)診斷有一定的參考意義。結(jié)核組胸腔積液中CCL2、CXCL10含量均高于組內(nèi)血清含量(P＜0.05)，提示CCL2、CXCL10不僅有從血漿擴(kuò)散入胸膜腔的途徑，還有可能由胸膜腔局部的胸膜間皮細(xì)胞或