犬瘟熱病毒熒光抗體的建立及初步應(yīng)用.pdf

1、犬瘟熱(CD)是由犬瘟熱病毒(CDV)引起的一種發(fā)病率和病死率都很高的急性傳染病，該病對(duì)犬科動(dòng)物、毛皮經(jīng)濟(jì)動(dòng)物及野生動(dòng)物的危害極大。因此，加強(qiáng)對(duì)CD的預(yù)防與控制的研究，能夠減少經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的損失，而建立快速和有效的CDV檢測(cè)方法是目前該研究的重點(diǎn)。 本研究采用單克隆抗體技術(shù)制備抗CDV核蛋白單克隆抗體，獲得了高表達(dá)抗CDV的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。 主要方法是：將犬瘟熱病毒純化后免疫雌性BALB/c小鼠，取其脾細(xì)胞與SP2

2、/0骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，經(jīng)克隆和間接ELISA篩選，獲得6株穩(wěn)定分泌抗犬瘟熱病毒單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株。經(jīng)過鑒定：其腹水效價(jià)分別為1：1×10<'7>、1：1×10,'7>、1：1×10<'7>、1：1×10<'5>、1：1×10<'4>、1：1×10<'4>；且與狂犬病病毒(RV)，犬細(xì)小病毒(CPV)、犬腺病毒(CAV)不發(fā)生交叉反應(yīng)；Western-blot分析表明，6株單抗均為抗犬瘟熱病毒核蛋白單抗。 采用G蛋白親和層