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文檔簡介
1、東南大學(xué)碩士學(xué)位論文通過酵母雙雜交篩選與DNlg4相互作用的蛋白姓名：林子英申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：生物學(xué)；遺傳學(xué)指導(dǎo)教師：謝維20120623ABSTRACTTitle：IdentificationofProteinsInteractingwithDNl94v／aYeastTwo—hybridSystemName：LinZiyingSupervisor：WeiXieUniversity：SoutheastUniversityABSTR
2、ACTNeuroligin，autismrelatedgone，isassociatedwithsynapseformationandfunctionbutthemechanismisunclearHomologuesofNeuroliginhavealsobeenidentifiedinthenervoussystemsofmanyinvertebratesincludingDrosophilafourhomologuesTheyar
3、eneurol譫inl4(dnlgl，anl92，antgs，ant94)SofaronlytwoofthefourhomologuesinDrosophilahavebeenfunctionallycharacterisedPutativednl94(CG34139)hasthehighesthomologytothevertebrateneuroligin，whichhas3843bpCDSandencodes1281AAsInad
4、ditionDNl94possessedacatalyticallyinactiveacetylcholinesteraselikedomain，Cterminal，transmembrane，andintracellularPDZdomainbindingmotifsHowever，thereisneportaboutdnl94ToexplorethebiologicalfunctionofDNl94，weutilizeyeasttw
5、ohybridmethodtoscreenthecandidateproteinsinteractingwithDNl94InviewofthecharacteristicsofmembraneproteinIdividedDNl94intotwOparts(ECDandICD)，respectivelyasbaitproteintoscreenDrosophillacDNAlibraryThebaitplasmids(pGBKT7DN
6、l94ECDandr，GBT9DNl94ICD)wereconstructedsuccessfullyAndtheexpressionofpGBKT7DNl94ECDand0GBT9一DNl94ICDwereconfhmedandnoselfactivationandcytotoxicityweredetectedEightpreyproteinsinteractingwithDNl94一ECDwerescreenedbyyeasttw
7、ohybridsystem，includingGlutactin，Prenylbindingprotein，Act57B，andATPase，aswellas4unknownproteins(includingCG2277，CG327ll，CG42593，CG4848)；twelvepreyproteinsinteractingwithDNl94ICDwerescreenedbyyeasttwohybridmethodincluding
8、nervana3，SCAPCG31644，UevlA，SseCG31999，CGlol40，NIPSNAP(CG9212)，CG32024，CGl0725，CG5168，c925cInfllrtherexperiments，IchooseNIPSNAPforGSTPulldownverification111eresultshowsthatDNl94ICDcaninteractwithNIPSNAPAgroupofpreyprotein
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