一個新的人類睪丸特異性基因—TDRG1的cDNA克隆及表達分析.pdf

1、新基因的表達譜分析是一個重要的推測新基因功能的手段。研究基因表達與否、何時表達、在什么部位表達能為新基因的功能研究提供有用的線索。 1 TDRG/基因在人睪丸組織不同發(fā)育時期的表達分析 在證實了TDRGI基因具有睪丸組織特異性的基礎(chǔ)上，本部分首先運用半定量RT-PCR技術(shù)研究了TDRG1基因在人睪丸組織不同發(fā)育時期的表達特征，結(jié)果發(fā)現(xiàn)．TDRG1基因在時空表達上具有發(fā)育階段特異性，即在正常胚胎睪丸組織中不表達，至成年期睪

2、丸組織中開始啟動該基因的表達，在成年期該基因表達最強，而在老年睪丸組織中表達明顯減弱。 許多在睪丸中表達的基因經(jīng)常具有細胞類型特異性或發(fā)育階段特異性，反映了組織在發(fā)育過程中的需求。睪丸不同發(fā)育階段差異表達的基因在某種意義上與睪丸發(fā)育特別是精子發(fā)生過程密切相關(guān)。TDRG1 mRNA在睪丸組織中的表達模式具有明顯的發(fā)育階段特異性，提示該基因在睪丸生殖細胞的發(fā)育過程中扮演重要角色，可能參與精子生成的過程。 2 TDRG1基因在

3、睪丸組織生殖細胞中的表達分析 為了進一步明確TDRG1基因在睪丸組織生殖細胞中的表達特點及其可能的功能作用，采用經(jīng)地高辛標(biāo)記的TDRG1 mRNA特異的多聚寡核苷酸探針，與人類睪丸組織進行原位雜交。發(fā)現(xiàn)TDRG1 mRNA在精母細胞及精細胞中有明顯表達，而在支持細胞、間質(zhì)細胞中無表達，具有明顯的生精細胞特異性。隱睪癥患者睪丸組織中TDRG1 mRNA的表達缺失。 精子生成包括連續(xù)的有絲分裂、減數(shù)分裂和減數(shù)分裂后階段。其中

4、精原細胞處于減數(shù)分裂前階段，精母細胞處于減數(shù)分裂開始階段，而精細胞處于減數(shù)分裂后階段。TDRG1 mRNA在人睪丸曲細精管中生精細胞特異性表達的特點表明，該基因在精子生成的不同階段存在差異表達，它可能參與控制男性正常精子形成的開始階段，并在減數(shù)分裂后期精子的發(fā)育過程中起作用。 小結(jié)：本研究運用數(shù)據(jù)庫消減雜交方法這一新策略結(jié)合實驗手段成功克隆了一個人類睪丸生精細胞相關(guān)的新基因TDRG1，并采用Northernblot、半定量RT-