姜黃素類化合物的提取分離鑒定及其與化療藥的協(xié)同抗腫瘤作用研究.pdf

1、目的：從中藥姜黃中提取分離、鑒定姜黃素類化合物，研究姜黃素單藥與臨床常用化療藥聯(lián)合用藥對(duì)人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人肺腺癌A549細(xì)胞的增殖抑制效果及其誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的協(xié)同作用，以探討其抗腫瘤的協(xié)同作用機(jī)制，為臨床尋找有效的化療增效劑提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。
　　 方法：通過(guò)硅膠柱色譜對(duì)姜黃80[％]乙醇提取物進(jìn)行分離純化，以理化方法及波譜學(xué)方法對(duì)分離得到的化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定；采用MTT法評(píng)價(jià)姜黃素類

2、單體化合物對(duì)人纖維肉瘤HT1080細(xì)胞、人乳腺癌MCF-7細(xì)胞、人肺腺癌A549細(xì)胞的增殖抑制作用；采用MTT法評(píng)價(jià)姜黃素單藥在HT1080細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、A549細(xì)胞上與順鉑、阿霉素、羥基喜樹(shù)堿等藥物聯(lián)合用藥的增效作用；通過(guò)Hoechst 33258染色觀察姜黃素和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)A549細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化；Western blot法檢測(cè)對(duì)A549細(xì)胞Bcl-2蛋白表達(dá)的影響。
　　 結(jié)果：
　　 (1)分離得

3、到3個(gè)姜黃素類化合物，分別鑒定為姜黃素curcumin(Ⅰ)，脫甲氧基姜黃素demethoxycurcumin(Ⅱ)，雙脫甲氧基姜黃素bisdemethoxycurcumin(Ⅲ)；
　　 (2)姜黃素、脫甲氧基姜黃素、雙脫甲氧基姜黃素對(duì)HT1080細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、A549細(xì)胞的增殖均有明顯的抑制作用，姜黃素的體外增殖抑制效果最好，對(duì)三種細(xì)胞株的半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為10.39μmol/L、11.85μmol/L、

4、10.25μmol/L。
　　 (3)在一定濃度范圍內(nèi)，姜黃素和順鉑、阿霉素、羥基喜樹(shù)堿分別聯(lián)合用藥對(duì)HT1080細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、A549細(xì)胞的增殖抑制有協(xié)同或相加作用。
　　 (4)姜黃素和阿霉素聯(lián)合用藥對(duì)A549細(xì)胞凋亡有協(xié)同作用，其作用可能是通過(guò)下調(diào)抑凋亡蛋白Bcl-2表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
　　 結(jié)論：姜黃素和順鉑、阿霉素、羥基喜樹(shù)堿分別聯(lián)合用藥對(duì)HT1080細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、A549細(xì)胞的增殖抑制有協(xié)