香蕉假莖薄片和多芽體切片胚性愈傷組織的誘導研究.pdf

1、中山大學碩士學位論文香蕉假莖薄片和多芽體切片胚性愈傷組織的誘導研究申請人：徐臨風導師：黃學林教授專業(yè)：植物學省掰要員會( 簽名)主席：名餳貉 主席：彪緞委員：啷芝9 一 ／愀> L 一 鰳移 p 陟毛 們傷中【l 』大學生命科學學院中國·廣州5 1 0 2 7 52 0 0 5 年5 月徐l l 缶最 中山大學碩士學位論文 2 0 0 5 年5 月組培苗假莖薄片( 5 0 0 ／．t m ) 誘導的愈傷組織的形態(tài)。預培養(yǎng)

2、培養(yǎng)基為M S 基本鹽，添加1 即m o l ／L 2 ，4 一D 和1 即m o l ／L D i c a m b a ?！埂偾o莖段經過一個月的預培養(yǎng)，然后再切薄片，分別在B 5 培養(yǎng)基中( 即基本鹽+ 改良維生素／氨基酸混合物+ 3 0 9 ／L 蔗糖+ W L 活性炭) 附加m m o l ／L I A A 和2 缸m o l ／L 2 , 4 一D ( 稱為B 5 a )和m 1 1 “ 1 0 I ／L L A A 和

3、1 0 , m o l ／L D i c a m b a ( 稱為B 5 b ) 培養(yǎng)一個月均能誘導出黃色顆粒狀、粘性較大的ⅡI 型愈傷組織。繼代后，增殖率為2 6 ．8 ％。在預培養(yǎng)實驗中還發(fā)現(xiàn)，如果將組培苗假莖莖段( 1 c m ) 保持原狀不切成薄片，在預培養(yǎng)基連續(xù)培養(yǎng)三個月，在整個莖段表面可形成黃色、顆粒狀、松碎Ⅳ型愈傷組織。I Ⅱ型和Ⅳ型愈傷組織都顯示胚性愈傷組織形態(tài)和細胞學特征。培養(yǎng)基中添加的生長素的種類也影響‘威廉斯’組培

4、苗假莖不經過預培養(yǎng)直接切成的薄片的愈傷組織的形態(tài)，培養(yǎng)一個月，在B 5 a 培養(yǎng)基上形成黃色、松脆、含水量高的I 型愈傷組織：而在B 5 b 培養(yǎng)基上形成白色、細小顆粒狀、松脆、含水量高I I 型愈傷組織。但這兩種愈傷組織繼代后，易褐化死亡。貢蕉假莖莖段在上述的預培養(yǎng)基中培養(yǎng)2 0 d ，就褐化死亡。因此預培養(yǎng)對貢蕉組培苗假莖薄片的愈傷組織誘導不適合。貢蕉組培苗假莖莖段直接切成的薄片在愈傷組織誘導培養(yǎng)基中可形成四種類型的愈傷組織。淺黃色

5、，松脆的A 型愈傷組織是在B 5 a 培養(yǎng)基上培養(yǎng)兩周形成的；如果將A 型愈傷組織在B 5 a 培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)兩周可在其表面形成淺黃色、細小顆粒狀的B 型愈傷組織：黃色，松散的C型愈傷組織是在B 5 b 培養(yǎng)基上培養(yǎng)一個月形成的；如果將C 型愈傷組織在％b 培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)一個月后可在其表面形成無色透明、含水量高的D 型愈傷組織。A型、丑型和D 型愈傷組織繼代后褐化死亡，只有C 型愈傷組織繼代后，其增殖率為8 8 ．7 ％。有趣的是，

6、將所誘導的愈傷組織與其它外植體誘導的胚性愈傷組織共培養(yǎng)可促進非胚性愈傷組織轉變?yōu)榕咝杂鷤M織，如將貢蕉誘導的C 型愈傷組織接種到F I ( M S 基本鹽+ 9 ．0 5 ／z m o t ／L 2 , 4 ，D + 5 ．7 虹m o l ／L I A A + 1 3 ．4 3 ／．t m o l ／LN A A ) 培養(yǎng)基中與東莞蕉未成熟花序誘導的胚性愈傷組織共培養(yǎng)可形成黃色、松散的E型胚性愈傷組織。根據(jù)愈傷組織的形態(tài)學特征和細胞學