花楸不同外植體的莖叢增生和愈傷組織誘導及植株再生.pdf

1、花楸(Sorbus pohuashanesis Hedl)是北方未被充分開發(fā)利用的優(yōu)良的綠化樹種.我們以幼胚、成熟胚、無菌莖叢的莖段、成年樹的嫩葉和莖段等為外植體,首次通過不定芽和腋芽增殖途徑建立了兩套高效、可靠的組培再生系統(tǒng).1、以花楸幼胚為外植體的研究表明:(1)取材時期和激素濃度配比是影響花楸幼胚叢生芽誘導效果的主要因素.(2)叢生芽最佳的增殖培養(yǎng)基為WPM+BA0.3~0.5mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂7g/L,經繼代培養(yǎng)一個

2、幼胚可誘導出7~20個小莖叢;帶有矮小不定芽的組織塊可繼代培養(yǎng)多次;(3)實驗從改變培養(yǎng)基種類、降低激素濃度、增加瓊脂濃度等方面采取有效的措施消除了莖叢增殖過程中的玻璃化現(xiàn)象;(4)當莖叢高達2~3cm時,轉入生根培養(yǎng)基誘導生根,篩選出最佳的生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.3mg/L或IBA0.2mg/L;(5)移栽前將根系發(fā)達的生根苗打開瓶蓋馴化3-5天,移入裝有珍珠巖的塑料缽中煉苗一周,然后移栽到泥炭土和河沙以2:1混合的基質中,

3、保持25±1℃,濕度>80﹪,成活率可達80﹪以上.2、以無菌莖叢的莖段為外植體,篩選出最佳的腋芽增殖培養(yǎng)基為:WPM+IBA(或NAA)0.05mg/L+BA1.0mg/L+蔗糖20g/L+瓊脂7g/L,腋芽最大增殖倍數(shù)可達6.3、以花楸成熟胚為外植體,在添加BA、TDZ、IBA、2,4-D、NAA組成的不同激素組合的MS培養(yǎng)基上培養(yǎng).4、以成年樹嫩葉和莖段為外植體,在添加BA、TDZ、IBA、NAA、2,4-D組成的不同激素組合的M

4、S培養(yǎng)基上培養(yǎng),以誘導愈傷組織的結果表明:(1)以幼嫩的莖段為外植體時,從愈傷組織的誘導率、體積和生長狀態(tài)綜合考慮,得出生長素的效應大小為NAA>2,4-D>IBA,最佳激素種類組合為NAA1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L、2,4-D1.0mg/L+BA0.5~3.0mg/L或TDZ0.01~0.5mg/L;(2)以幼嫩的葉片為外植體時,雖然誘導率可達100﹪,但只是在切口處長小米粒大小的愈傷組織,生長素的誘導效應大小為2,4