中國胞囊線蟲屬（Heterodera）主要種群形態(tài)學(xué)及rDNA比較研究.pdf

1、該研究對不同的大豆胞囊線蟲(Heteroderaglycines)群體和中華異皮線蟲(H.sinensis)、禾谷胞囊線蟲(H.avenae)及寄生于煙草根部的胞囊線蟲等種從形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)兩方面進行了比較和分析.通過制作永久玻片和臨時玻片,對一些重要的胞囊線蟲種及種下群體進行了詳細的形態(tài)學(xué)觀察,通過掃描電鏡觀察了二齡幼蟲唇區(qū)結(jié)構(gòu)、側(cè)區(qū)側(cè)線數(shù)等重要特征,同時對二齡幼蟲的體長、口針長、尾長及透明尾長等主要鑒別特征進行了形態(tài)測量.結(jié)果表明

2、:寄生于煙草根部的胞囊線蟲無論從唇區(qū)結(jié)構(gòu)、側(cè)線數(shù)目、還是從各項測量數(shù)值上,與大豆胞囊線蟲群體均無明顯差別.中華異皮線蟲與其他種相比差異較大.對全部樣品rDNA的ITS區(qū)進行了PCR擴增,并用AluI,Bshl236I,BsurI,CfoI,DdeI,Hinfl,MspI及RsaI等8種限制性內(nèi)切酶對擴增產(chǎn)物進行了酶切分析及序列測定.PCR擴增結(jié)果表明:所有樣品擴增片段長度均為1,030bp左右;RFLPs分析表明:經(jīng)Alu I,Cfo

3、I,Rsa I及Mva I等酶切后,各大豆胞囊線蟲群體均得到了相同的酶切圖譜.經(jīng)Ava I酶切后,部分來自山西太谷的大豆胞囊線蟲群體產(chǎn)生兩類酶切圖譜,顯示出群體內(nèi)存在一定的差異.另外,中華異皮線蟲經(jīng)除CfoI酶以外的7種酶酶切后,得到的酶切圖譜與其它種存在明顯的差異.通過對中國主要的胞囊線蟲種群rDNA中ITS區(qū)的序列測定及同源性分析明確了不同種群的系統(tǒng)學(xué)關(guān)系.其中大豆胞囊線蟲種內(nèi)群體間rDNA中ITS區(qū)間差異極小;寄生于煙草的胞囊線蟲

4、與大豆胞囊線蟲各群體差異不明顯,相似度高達99％,結(jié)合形態(tài)學(xué)特征,初步將寄生于煙草的胞囊線蟲鑒定為大豆胞囊線蟲;中華異皮線蟲同大豆胞囊線蟲差異明顯,相似度僅為77％,而與甘蔗胞囊線蟲(H.sacchari)的同源性較高,相似度為86％,這也是國際上首次報道中華異皮線蟲的分子信息.另外,根據(jù)所測定的序列比較而得出的大豆胞囊線蟲種內(nèi)群體及胞囊線蟲種間親緣關(guān)系與Subbotin et al.(2001)根據(jù)形態(tài)學(xué)差異所進行的分組是完全相符的.