甘薯耐鹽突變體的離體篩選及鑒定.pdf

1、用甘薯品種栗子香和徐薯18的胚性懸浮細(xì)胞為材料,以NaCl作為耐鹽選擇劑,采用輻射誘變和離體重復(fù)篩選相結(jié)合的方法,對(duì)甘薯耐鹽突變體的離體篩選進(jìn)行了系統(tǒng)研究.用80Gy<'60>Coγ-射線輻照處理栗子香和徐薯18的胚性懸浮細(xì)胞,輻射處理后1周,將胚性懸浮細(xì)胞培養(yǎng)在含有2.0﹪NaCl和2.0mg/L2.4-D的MS液體培養(yǎng)基中進(jìn)行離體篩選,4周后,逐步去掉選擇壓.通過(guò)離體篩選由栗子香和徐薯18分別獲得270個(gè)和75個(gè)抗性細(xì)胞團(tuán).將獲得的

2、抗性細(xì)胞團(tuán)轉(zhuǎn)移到添加2.0mg/L 2,4-D但不加NaCl的MS 固體培養(yǎng)基上,這些胚性細(xì)胞團(tuán)增殖形成胚性愈傷組織.將這些胚性愈傷組織進(jìn)一步轉(zhuǎn)移到添加2.0﹪NaCl和1.0mg/L ABA的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行重復(fù)篩選,分別得到223個(gè)和36個(gè)抗性胚性愈傷組織,并形成體細(xì)胞胚.最后在MS基本培養(yǎng)基上分別誘導(dǎo)出276株和40株完整再生植株,即耐鹽變異體.從栗子香耐鹽變異體中隨機(jī)抽取30株,從對(duì)照中隨機(jī)抽取10株,分別培養(yǎng)在含有0.5﹪、1

3、.0﹪、1.5﹪和2.0﹪NaCl的MS培養(yǎng)基上,結(jié)果表明耐鹽變異體的長(zhǎng)勢(shì)明顯優(yōu)于對(duì)照.在0.5﹪NaCl脅迫下,對(duì)栗子香160株耐鹽變異體進(jìn)行SOD和脯氨酸檢測(cè),結(jié)果表明,其中29株耐鹽變異體的SOD活性顯著高于對(duì)照植株,51株耐鹽變異體的脯氨酸含量顯著高于對(duì)照植株,SOD活性和脯氨酸含量均顯著高于對(duì)照的為7株.對(duì)脯氨酸含量顯著高于對(duì)照的51株耐鹽變異體進(jìn)行過(guò)氧化物酶同工酶分析,結(jié)果表明,其中的14株譜帶與對(duì)照相比有明顯差異;酯酶同工