大蔥再生體系建立及內(nèi)源激素變化的研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文大蔥再生體系建立及內(nèi)源激素變化的研究姓名：盛艷萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：蔬菜學(xué)指導(dǎo)教師：楊建平張松20040620山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要本文建立了以成熟胚為外植體的大蔥高效離體再生體系，并對(duì)其再生過(guò)程中內(nèi)源激素含量的變化進(jìn)行了分析，以期探討內(nèi)源激素的作用機(jī)制，并對(duì)大蔥組織培養(yǎng)中外源激素的合理添加提供理論依據(jù)。主要結(jié)果如下：試驗(yàn)通過(guò)對(duì)大蔥不同器官：幼葉、根、花蕾和成熟胚進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，結(jié)果表明成熟胚為最佳外

2、植體，誘導(dǎo)率高且穩(wěn)定；花蕾次之，關(guān)鍵是掌握幼蕾的時(shí)期；幼葉和根較難誘導(dǎo)愈傷組織產(chǎn)生。大蔥成熟胚在添加24D1020mg1以6BA2040mg1以的培養(yǎng)基上都可產(chǎn)生質(zhì)量較好的愈傷組織，其中最佳誘導(dǎo)愈傷組織的激素組合為2106一1～。愈傷組織繼代培養(yǎng)初期以2，44D10mgBA20mgD10mg146BA20mg10為好，24D濃度過(guò)低或者代之以NAA都會(huì)導(dǎo)致愈傷組織過(guò)早的進(jìn)入分化階段，不利于增殖。繼代培養(yǎng)后期應(yīng)適時(shí)降低24D濃度，以使愈傷

3、組織能保持較好的分化性能。大蔥愈傷組織分化的激素組合以NAA05mg1d6BAl0mg1d為最好，分化率達(dá)8167％。6BA濃度升高雖然可以提高分化率，達(dá)8333％，但是極易導(dǎo)致嚴(yán)重的玻璃化。大蔥愈傷組織分化產(chǎn)生不定芽后應(yīng)及時(shí)轉(zhuǎn)移到MSo培養(yǎng)基上，以逐步消除玻璃化現(xiàn)象，保證不定芽的正常生長(zhǎng)。馴化移栽大蔥再生苗的最佳基質(zhì)為未滅菌的蛭石與草碳的混和基質(zhì)(蛭石：草碳=1：1)，可能是其透氣性和保水性比較適合大蔥再生苗的生長(zhǎng)。大蔥成熟胚誘導(dǎo)30

4、d的愈傷組織分別在24D10mg1‘16一BA20mg1q和21d61。1各繼代，然后轉(zhuǎn)移到1‘14DO5mgBA20mg30dNAA025mg6BAl0mg1。1培養(yǎng)基上或僅降低24D濃度，可誘導(dǎo)胚狀體的產(chǎn)生，前者的發(fā)生率明顯高予后者，說(shuō)明2，4D對(duì)于大蔥胚狀體的產(chǎn)生有抑制效應(yīng)，而NAA則可能有促進(jìn)作用。大蔥的花蕾和愈傷組織都對(duì)抗生素Kan有很高的抗性，在Kan濃度高達(dá)2000mg，l。1時(shí)也有一定的存活率，愈傷組織甚至還能蜘3635