葡萄胚培養(yǎng)與育種技術(shù)的研究.pdf

1、以二倍體葡萄品種'無核白'、'里扎馬特'、'全球紅'和四倍體葡萄品種'巨峰'為研究材料進(jìn)行二倍體與四倍體、二倍體間正反雜交,常規(guī)育種方法去雄授粉.在授粉后35d~75d期間采用胚培養(yǎng)技術(shù),不同時(shí)期取樣并接種胚在不同培養(yǎng)基上離體培養(yǎng),應(yīng)用低溫處理結(jié)合橫切以及切喙方法以打破休眠,促進(jìn)胚發(fā)育和萌發(fā)以進(jìn)行雜種培育和培養(yǎng)方法的研究,對(duì)蘇木精等5種染色劑進(jìn)行篩選用于二倍體與四倍體雜種幼苗的染色體鑒定.結(jié)果表明:'無核白'雜交胚和自花授粉胚35d取樣

2、發(fā)育最好,但各時(shí)期取樣的萌發(fā)率之間差異不顯著.'巨峰'雜交胚和自花授粉胚55d取樣發(fā)育最好,60d取樣的萌發(fā)率最高.'里扎馬特'雜交胚和自花授粉胚60d取樣的發(fā)育率和萌發(fā)率最高.'全球紅'雜交胚和自花授粉胚60d取樣發(fā)育最好,75d取樣萌發(fā)率最高.取樣所有時(shí)期中,'無核白'自花授粉胚和雜交胚的發(fā)育率和萌發(fā)率之間都無顯著差異,'巨峰'自花授粉胚的發(fā)育率比雜交胚的發(fā)育率高,萌發(fā)率之間無顯著差異.'里扎馬特'自花授粉胚和雜交胚的發(fā)育率之間無顯

3、著差異,自花授粉胚的萌發(fā)率高于雜交胚的萌發(fā)率.'全球紅'自花授粉胚和雜交胚中,'全球紅'×'無核白'的發(fā)育率和萌發(fā)率最高.胚在MS、Nitsch基本培養(yǎng)基和3％、6％蔗糖濃度的4種組合中發(fā)育無明顯區(qū)別,在MS+6％蔗糖中萌發(fā)最好.胚在0.5mg/L GA<,3>中只有部分萌發(fā),提高GA3濃度可以促進(jìn)未萌發(fā)的胚繼續(xù)萌發(fā),2.0mg/L濃度的處理中萌發(fā)率有顯著的提高.雜交胚的發(fā)育率和萌發(fā)率與母本胚的發(fā)育率和萌發(fā)率正相關(guān),表示發(fā)育行為和萌發(fā)行

4、為都接近母本胚.高溫(30℃以上)抑制成苗,幼苗生長緩慢.高濃度生長調(diào)節(jié)劑影響后期成苗:細(xì)胞分裂素濃度過高葉片畸形、面積過大.生長素濃度過高根莖部位產(chǎn)生愈傷組織,導(dǎo)致葉片和根生長緩慢.2.5％纖維素酶和果膠酶的混合酶液中,果膠酶的比例為2.0％適合葡萄組培苗根尖的酶解,解離后的根尖細(xì)胞分散,結(jié)合后低滲處理利于觀察染色體.根尖染色體用蘇木精色染色的效果優(yōu)于醋酸洋紅、吉姆薩、卡寶品紅和改良品紅的染色效果.二倍體間雜交胚成苗50棵,二倍體與四