中華絨螯蟹常見病原的分離鑒定、致病及免疫機(jī)制研究.pdf

1、對(duì)患弧菌病的中華絨螯蟹進(jìn)行了細(xì)菌性病原的分離和鑒定,從病蟹體內(nèi)分離到三株病原菌,其生理生化特性、菌株形態(tài)及菌落形態(tài)均一致,經(jīng)鑒定為副溶血弧菌(Vibrio parahemolyticus).人工注射感染健康蟹,2d內(nèi)均發(fā)生死亡,死亡率100％,并且癥狀同自然發(fā)病癥狀相似,證實(shí)副溶血弧菌為中華絨螯蟹弧菌病的病原菌.對(duì)患?xì)鈫伟?含腹水病)的中華絨螯蟹進(jìn)行了細(xì)菌性病原的分離和鑒定,從病蟹體內(nèi)分離到三株病原菌,均為革蘭氏陰性桿菌,單極生鞭毛

2、,運(yùn)動(dòng),兼性厭氧,發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣等,經(jīng)鑒定這三株病原菌均屬氣單胞菌;再經(jīng)其它生物學(xué)特性測定,兩株與易損氣單胞菌的形態(tài)特征、生理生化特性基本相同,故將這兩株病原菌鑒定為易損氣單胞菌(Aeromonas trota);另外一株與嗜水氣單胞菌的形態(tài)特征、生理生化特性基本相同,故將此株病原菌鑒定為嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophila).蟹源致病性的易損氣單胞菌和嗜水氣單胞菌均可產(chǎn)生外膜蛋白、胞外蛋白酶、溶血素等致病因子.根

3、據(jù)氣單胞菌已發(fā)表的氣溶素基因序列設(shè)計(jì)引物,采用PCR技術(shù),從蟹源致病性易損氣單胞基因組中克隆出長為622bp的基因片斷,內(nèi)切酶BamHI對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切,產(chǎn)生長約570bp和50bp兩條片斷.研究還利用設(shè)計(jì)的特異引物,采用PCR技術(shù),對(duì)蟹源致病性易損氣單胞菌進(jìn)行了快速分子鑒定的研究.中華絨螯蟹“抖抖病”是一種危害嚴(yán)重、流行面廣的蟹病,為防治該病我們對(duì)病蟹進(jìn)行了病原初步研究.為了防治中華絨螯蟹的傳染性疾病,使用各種抗菌劑仍被作為目前的主

4、要對(duì)策,但是由于耐藥性病原菌的形成以及環(huán)境污染問題等方面的考慮,正確使用疫苗或免疫增強(qiáng)劑來提高中華絨螯蟹自身的抗病能力,是以后預(yù)防蟹病發(fā)生的途徑.盡管甲殼動(dòng)物的血淋巴液內(nèi)不存在免疫球蛋白,但是具有非特異性免疫的性質(zhì),適當(dāng)?shù)恼T導(dǎo)可提高血細(xì)胞的吞噬能力及多種體液免疫因子的數(shù)量和活性.研究發(fā)現(xiàn),肌肉注射嗜水氣單胞菌疫苗后一定時(shí)間內(nèi),中華絨螯蟹血清溶菌酶、超氧化物酶歧化酶(SOD)、酚氧化酶(PO)活力均有所升高,免疫保護(hù)率為74.7％,證明肌