國(guó)內(nèi)外PRRSV美洲型毒株結(jié)構(gòu)基因序列分析及感染豬病理和細(xì)胞免疫變化的研究.pdf

1、1995年郭寶清等首次從國(guó)內(nèi)疑似PRRS的豬群分離到PRRSV,從而證實(shí)中國(guó)也有PRRSV的流行,隨后在中國(guó)大部分地區(qū)相繼檢出PRRSV.為查明中國(guó)不同地區(qū)PRRSV的來源及遺傳學(xué)差異,為研制有效疫苗提供分子生物學(xué)根據(jù),該研究在獲得CH-la株完整的基因組序列以后,根據(jù)Genebank發(fā)表的序列,設(shè)計(jì)了不同的引物對(duì),利用PCR技術(shù),對(duì)對(duì)流行于中國(guó)山東(SD株)和大慶地區(qū)(DQ株)的PRRSV結(jié)構(gòu)基因ORF2~ORF7各結(jié)構(gòu)基因擴(kuò)增條件進(jìn)

2、行優(yōu)化,獲得了不同的目的基因片段然后進(jìn)行序列分析,并將其與CH-1a株、BJ-4株、LV株以及VR-2332株進(jìn)行了比較分析.為深入研究PRRS的發(fā)病機(jī)理和PRRSV對(duì)斷奶仔豬致病情況,該試驗(yàn)利用美洲型代表毒株VR-2332接種妊娠后期母豬和斷奶仔豬,尋找病理變化特征和確定病毒組織分布,以便為有效預(yù)防、診斷和有針對(duì)性治療提供理論依據(jù).應(yīng)用VR-2332強(qiáng)毒人工感染4頭妊娠末期母豬和5頭斷奶仔豬,復(fù)制典型病例,對(duì)死胎和弱仔及感染斷奶仔豬進(jìn)

3、行組織病理學(xué)檢查,并用間接免疫熒光試驗(yàn)檢測(cè)病毒組織分布.通過上述的實(shí)驗(yàn)研究,實(shí)現(xiàn)了對(duì)國(guó)內(nèi)不同地區(qū)PRRSV代表株的結(jié)構(gòu)基因解析,確定了國(guó)內(nèi)流行的SD毒株和DQ毒株毒株均屬于美洲型,與美洲型毒株具有高度的同源性.通過確定病毒侵害細(xì)胞和組織的種類和部位,為有針對(duì)性診斷指明采樣方向.并通過監(jiān)測(cè)對(duì)PRRSV感染豬細(xì)胞免疫和體液免疫,了解了PRRSV感染時(shí)豬體免疫功能的變化規(guī)律.這不僅為疫苗研制提供分子生物學(xué)基礎(chǔ),而且對(duì)建立快速的臨床病理學(xué)診斷和