番鴨呼腸孤病毒受體的研究.pdf

1、目的:近年雛番鴨感染呼腸孤病毒后出現(xiàn)高死亡率,結(jié)合臨床癥狀及相關(guān)資料推斷番鴨呼腸孤病毒受體很可能為β2-腎上腺素受體,該文擬通過確定番鴨呼腸孤病毒(DRV)受體分子量并與哺乳動物呼腸孤病毒3型受體即β-腎上腺素受體分子量相比較看二者有無相關(guān)性,并從動態(tài)方面檢測該病毒感染對番鴨腎上腺素釋放水平的影響,看該病毒受體與β-腎上腺素受體的關(guān)系,從而對番鴨呼腸孤病毒受體的定性提供進(jìn)一步的證據(jù),為研制相關(guān)抗病毒藥物提供理論依據(jù).方法與結(jié)果:通過將培

2、養(yǎng)的生長旺盛的番鴨成纖維細(xì)胞接種DRV B3病毒株增殖病毒,待細(xì)胞病變達(dá)50％~80％時收毒,凍融三次后離心濃縮病毒液,并通過鹽析和透析提純病毒液,紫外分光法測病毒蛋白濃度為5mg/mL.攻毒大番鴨采血制備血清測瓊擴(kuò)效價達(dá)1:32.提純番鴨紅細(xì)胞膜蛋白測濃度為29mg/mL.在膜蛋白上樣濃度7.5ug/uL、標(biāo)準(zhǔn)蛋白上樣濃度0.4ug/uL、上樣體積50uL、恒流30mA條件下SDS-PAGE電泳后所得蛋白條帶最清晰.采用病毒鋪覆蛋白印