三疣梭子蟹消化酶性質(zhì)的研究.pdf

1、該論文綜述了國(guó)內(nèi)外甲殼動(dòng)物消化酶研究的進(jìn)展,利用酶學(xué)研究的方法研究了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)消化酶的性質(zhì).文中探討了①溫度、pH對(duì)三疣梭子蟹消化酶活性的影響及熱、酸堿穩(wěn)定性.②不同底物及濃度對(duì)三疣梭子蟹消化酶活力的影響.③反應(yīng)介質(zhì)中NaCl濃度對(duì)三疣梭子蟹消化酶活力的影響④金屬離子對(duì)三疣梭子蟹消化酶活力的影響.1、蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶的最適溫度分別為55℃、55℃、65℃;在最適溫度下測(cè)得蛋白酶

2、、淀粉酶、纖維素酶的最適pH分別為7-8、7.5、4.8.消化酶在短時(shí)間內(nèi)有很高的熱穩(wěn)定性和很廣的酸堿穩(wěn)定性范圍.中腸腺是蛋白酶的主要分泌器官,淀粉酶在不同消化組織沒(méi)有顯著差異.胃和腸是纖維素、脂肪的主要消化器官.2以酪蛋白、TAME、SAPPN、馬尿酰苯丙氨酸、N-馬尿酰-L-精氨酸、淀粉、羧甲基纖維素鈉為底物,三疣梭子蟹中腸腺蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A、羧肽酶B、淀粉酶、纖維素酶活力在底物濃度分別為:5mg/ml、0.

3、6mM、1mM、0.5mM、0.45mM、4mg/ml、0.6mg/ml時(shí)活力最大.米氏常數(shù)(K<,m>)分別為1.185mg/ml、0.132mM、0.147mM、0.119mM、0.194mM、1.25mg/ml、0.3mg/ml.BAEE為三疣梭子蟹中腸腺胰蛋白酶最適底物,不同消化器官對(duì)不同胰蛋白酶底物的消化能力不一致.3、以酶學(xué)分析的方法研究10種金屬離子(Cu<'2+>、Mg<'2+>、Fe<'3+>、Hg<'2+>、Zn<'

4、2+>、Ca<'2+>、Pb<'2+>、Cd<'2+>、Ag<'2+>和Mn<'2+>)對(duì)三疣梭子蟹蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A、羧肽酶B、淀粉酶和纖維素酶活力的影響,實(shí)驗(yàn)表明,在實(shí)驗(yàn)高置的濃度范圍內(nèi),Ca<'2+>、Mn<'2+>、Mg<'2+>、Fe<'3+>、Pb<'2+>、在低濃度(0.5mM)對(duì)蛋白酶活力影響不顯著,其他金屬離子影響顯著;Ca<'2+>、Cd<'2+>、Mg<'2+>、Mn<'2+>在三種濃度下,對(duì)

5、胰蛋白酶均表現(xiàn)為顯著性激活作用;Ca<'2+>對(duì)胰凝乳蛋白酶有激活作用,Mg<'2+>和Cu<'2+>在低濃度對(duì)羧肽酶A有激活作用;Ca<'2+>對(duì)羧肽酶B有激活作用,Mg<'2+>在低濃度對(duì)羧肽酶B有激活作用;Ca<'2+>、Cd<'2+>、Mn<'2+>對(duì)淀粉酶表現(xiàn)為激活作用,Zn<'2+>、Fe<'3+>、Pb<'2+>低濃度對(duì)淀粉酶有激活作用;Zn<'2+>、Fe<'3+>、Mn<'2+>、Cu<'2+>對(duì)纖維素酶表現(xiàn)為激活作用

6、.除此之外,其他金屬離子均表現(xiàn)為抑制作用,且抑制作用隨濃度的升高而升高.4、該文以酶學(xué)分析的方法研究了在反應(yīng)介質(zhì)中添加NaCl對(duì)三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)中腸腺蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧肽酶A、羧肽酶B、淀粉酶活力的影響,NaCl濃度設(shè)置為OM、0.0005M、0.01M、0.05M、0.1M、0.5M、1.0M、2.0 M八個(gè)梯度.實(shí)驗(yàn)表明,反應(yīng)介質(zhì)中添加NaCl對(duì)消化酶活力影響顯著,除羧肽

7、酶B外,反應(yīng)介質(zhì)中添加NaCl對(duì)三疣梭子蟹消化酶均有激活作用.當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)中NaCl濃度為0.1-0.5M時(shí)蛋白酶活力最大;當(dāng)反應(yīng)介質(zhì)中NaCl濃度0.5M時(shí)胰蛋白酶活力最大;胰凝乳蛋白酶在反應(yīng)介質(zhì)中NaCl濃度為1M時(shí)酶活力最大;三疣梭子蟹羧肽酶A在反應(yīng)介質(zhì)中NaCl濃度為0.05-0.1M時(shí)酶活力最大;NaCl對(duì)羧肽酶B有抑制作用,在反應(yīng)介質(zhì)中2MNaCl的條件下,有未加NaCl時(shí)酶活力的60﹪;NaCl在0-2M的范圍內(nèi)對(duì)淀粉酶均有