Dot-PPA-ELISA快速檢測(cè)豬丹毒抗體方法的建立及應(yīng)用研究.pdf

1、四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文DotPPAELISA快速檢測(cè)豬丹毒抗體方法的建立及應(yīng)用研究姓名：肖國(guó)生申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)指導(dǎo)教師：文心田20030501引言1概述豬丹毒是由豬丹毒桿菌引起的一種人、畜共患傳染病，臨診可表現(xiàn)為急性敗血型、亞急性疹塊型或慢性增生型(心內(nèi)膜炎、關(guān)節(jié)炎、淋巴節(jié)炎)，有時(shí)還可引起母豬流產(chǎn)和小豬腹瀉【l～。豬丹毒廣泛分布于五大洲的各個(gè)國(guó)家，是豬傳染病中重要而古老的病種之一。1979年Koch從家鼠分離到豬丹

2、毒桿菌，當(dāng)時(shí)命名為“鼠丹毒敗血菌”，1885年L6effer從患病豬的皮膚血管中分離到同樣的細(xì)菌，此后公認(rèn)為該菌為豬丹毒的病原菌，1909年Rosenbach從人的患病皮膚中分離到本菌，并證明可引起人的類丹毒。豬丹毒是一種自然疫源性疾病，至今世界各國(guó)尚未徹底凈化本病，可給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了重大的經(jīng)濟(jì)損失，對(duì)人類健康也構(gòu)成威脅。我國(guó)是豬丹毒流行較廣泛的國(guó)剝引。近年新發(fā)現(xiàn)，少數(shù)牛源丹毒絲菌對(duì)豬或鼠有致病性，能引起豬發(fā)熱和全身或局部蕁麻疹。提示牛在

3、豬丹毒流行病學(xué)中的作用14、5】。另外還發(fā)現(xiàn)對(duì)小白鼠不致病的豬丹毒弱毒菌株，其培養(yǎng)物保存于20~30℃的恒溫箱中，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間，其毒力可增強(qiáng)【6】。家鼠是豬丹毒的一種傳播媒介，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)蚊蟲吮吸病豬的血液后，蚊蟲體內(nèi)帶有豬丹毒桿菌。經(jīng)證明傳染性胃腸炎病毒可增強(qiáng)豬丹毒杼菌的致病性【_”。2豬丹毒桿菌的抗原結(jié)構(gòu)豬丹毒桿菌的抗原構(gòu)造至今尚不十分清楚，已知在細(xì)胞肇上有耐熱的粘肽和糖肽等類物質(zhì)，它們具有型特異性，是血清型分類的基礎(chǔ)，其耐熱性抗原可

4、以用瓊擴(kuò)法進(jìn)行豬丹毒的分型，但Chin等【8】證實(shí)在熱提抗原中還含有大分子蛋白質(zhì)抗原。除型特異性耐熱肽糖抗原外，多數(shù)豬丹毒桿菌有一種或多種共同的不耐熱抗原，一般是蛋白質(zhì)或蛋白糖脂復(fù)合物，可呈現(xiàn)交叉凝集反應(yīng)[91。Tamura等【1q用SDSPAGE對(duì)不周豬丹毒型和株的細(xì)胞蛋白分析發(fā)現(xiàn)紅斑丹毒絲菌的電泳圖譜包括大約20個(gè)條帶，其主要蛋白分子量為68，56，54，41，38，32，16，15，13和12KD；扁桃體丹毒菌的電泳圖譜包括大約2

5、4個(gè)條帶，其主要蛋白分予量為74，68，56，54，44，38，32，16，15，13和10KD。不同提取方法所獲得的抗原成分不一樣。Ⅺ扭iima等Iu讕NaOH裂解法所提取的具有強(qiáng)免疫原性蛋白分子量是67—64和6260KD。Lachmann等1121報(bào)道用EDTA，CHAPS，TritonX和SDS提取的主要蛋白分子量是78，72，68和48KD。3豬丹毒桿菌的血清型和致病性至今已發(fā)現(xiàn)la、】b、2、3～24和N型共26個(gè)血清型，大