抑制素主動免疫、He-Ne激光穴位照射影響牛超排效果及機(jī)理研究.pdf

1、抑制素主動免 疫、 H e - N e 激光穴 位照 射影響牛超排效果及其機(jī)理研究摘 要本試驗分別用豬精液抑制素 ( I B ) 抗原主動免疫、 H e - N e激光穴位照射供體母牛，并結(jié)合外源純化 F S H超排處理的 方法，以 研究抑制素主動免疫、 激光穴位照射對牛超 排效果的 影響 ， 探索 提高牛 超排 效果的 新 途徑。 通過 檢測供體母牛不同 生理時 期血 液中 相關(guān)生 殖激素的 水平， 進(jìn)一步 探明 抑制素免疫和激 光照

2、射影響 牛 超排效果的機(jī)理。1 、 選 產(chǎn) 后5 0 d 以 上 的 3 ^ - 5 歲 荷 斯 坦 母 牛1 2 頭 和 西 雜 青 年 母 牛1 2 頭 ， 按 其 發(fā)情順序隨 機(jī)分為試驗組和對照組，每組 1 2 頭。 試驗組用完全福氏 佐劑乳化的 I B 抗原進(jìn)行首免， 間隔2 0 d 再 用不完全福氏 佐劑乳化的I B 抗原進(jìn)行加免一次， 加免第6 d開始采用純化 F S H做超排處理， 觀察發(fā)情， 適時 進(jìn)行配種，于配 種后第

3、 7 d 進(jìn)行非手術(shù)法采卵。 對照組只是用純化 F S H做超排處理。 參試牛于不同生理時期頸靜脈采血 ， 分 離 血 清 ， 用 放 免 法 測 定 各 生 理 時 期 血 清中F S H , L H , E z , 幾水 平 。 本 研 究 結(jié)果 表明:( 1 ) 抑制素 主動免疫可以 提高 牛超排 效果， 試驗組頭均胚胎數(shù) 和頭 均可用胚胎 數(shù)分別比 對 照組 增 加 2 . 4 枚 和 1 . 4 枚 ( p < 0

4、. 0 5 ) ;( 2 ) 抑 制素 主動免 疫可以 提高母牛血漿中F S H 水平， 促使卵泡發(fā)育， 從而增加胚胎數(shù)和可用胚胎數(shù)， 也就是說，通過I B 抗原免 疫， 可中 和體內(nèi)I B ， 減輕 對垂體分 泌F S H 的 抑 制 作用， 促進(jìn)F S H 的合成和分泌。2 、 選產(chǎn)后5 0 d 以 上的3 ^ - 5 歲 荷斯坦母 牛1 1 頭 和西雜青 年母牛1 2 頭， 按 其發(fā)情 順 序隨 機(jī)分為 試 驗組 ( 1 1 頭

5、) 和 對照組 ( 1 2 頭) 。 試驗 組供體牛 發(fā)情 后 第9 -1 2 d同時 用外源F S H 做超排處理和激光照射， F S H 總劑量為7 m g . H e - N e 激光照射采用3 0 m w交巢穴 照射的 方 法。 對照組 超排處 理的 方 法和劑 量同 試驗組完 全相同， 只是 不進(jìn)行激光照射石 超排后觀察發(fā)情， 適時配 種，于配種后第 7 d進(jìn)行非手術(shù)法采卵。 每頭此 物 質(zhì)命 名 為 抑制 素 以 來[ 2

6、J ， 各國 學(xué) 者 先 后在 牛、 羊、 豬、 人 等 精液中 分 離 純 化到具有 I B樣活性物， 人們對抑制素的認(rèn)識也逐漸深入。 針對抑制素在動物繁殖中的應(yīng)用，國內(nèi) 外 研究 者 近 年來做了 大量 研究， 結(jié) 果 發(fā)現(xiàn)， I B 對 動 物生 殖活 動， 如卵 泡發(fā)育起重要的調(diào)控作用。 利用 I B為免疫原主動或被動免疫雌性動物均可不同 程度提高 排 卵率 和產(chǎn)仔 數(shù)[ 3 ] 。 特別是 近十 幾 年來，由 于細(xì) 胞培養(yǎng)技

7、術(shù)、 蛋白 分離技術(shù) 和D N A的 序列分 析及 其分子 雜 交技術(shù)的 發(fā)展， 在抑制素的 分子結(jié) 構(gòu)、 合成部位及其 作用 機(jī) 制 等 生 理 生 化 研 究 方 面 己 取 得 重 大 進(jìn) 展 。目 前國 內(nèi) 外正 投 入 大 量 研 究[ 4 - 1 1 1 ，以期研制出以 I B為 免疫原的疫苗， 用以 誘導(dǎo)動物，尤其是排卵數(shù)較少的 如牛羊等的多胎妊娠，并取得了良 好效果。激 光技術(shù)自 本世 紀(jì)7 0 年代 初期 應(yīng)用以 來，

8、 得到 畜 牧獸 醫(yī)學(xué) 領(lǐng)域的 廣泛關(guān) 注[ 1 2 3在治療動物鎮(zhèn)痛、 外傷以 及消化系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)疾病等方面發(fā) 揮了 獨特的作用。 進(jìn)入 8 0年代， 激光技 術(shù)開 始 應(yīng)用于 動物繁 殖 領(lǐng)域。 并己 初步驗證， 激光照 射可促使母畜發(fā)情， 有提高 排卵率的 趨勢， 但激光照射用于動物超排的 研究報道還比 較少?，F(xiàn)據(jù)國 內(nèi) 外 近年 來文 獻(xiàn)資 料， 對超排 研究 進(jìn)展、 抑制素 和 激 光在動物繁 殖中 研究應(yīng)用情況做一概 述。

9、二、超排研究進(jìn)展[ 1 3 - 2 0 1( 一) 超排的 生 理學(xué) 基礎(chǔ)哺乳動物卵巢上含有大量卵泡， 而最終能排卵的僅是少數(shù)，同 階段發(fā)生閉鎖而消失。以 牛為例， 牛胚胎胎齡 1 1 0日 齡時為大部分在發(fā)育的不2 7 0 萬個卵泡， 初生母 犢 有7 5 0 0 0 個， 1 - 1 4 歲 為2 5 0 0 。 個， 到2 0 歲時降 為3 0 0 0 個。 生 長期的 卵 泡 數(shù)目是由以 下因 索決定的:( 1 ) 靜止卵泡發(fā)育