不同日齡肉鴨對(duì)坦布蘇病毒的易感性研究.pdf

1、2010年，我國(guó)華東地區(qū)主要肉鴨、蛋鴨養(yǎng)殖區(qū)暴發(fā)了一種以雛鴨食欲減退、生長(zhǎng)緩慢、神經(jīng)障礙及蛋鴨產(chǎn)蛋大幅下降為主要臨床特征的急性傳染病。該疾病最初被命名為鴨出血性卵巢炎(DHO)，進(jìn)一步研究證明，該病是由一種新型黃病毒——坦布蘇病毒(TMUV)引起。TMUV屬于黃病毒科，黃病毒屬，恩塔亞病毒群(Cao et al.，2011)。TMUV感染嚴(yán)重威脅我國(guó)水禽業(yè)的健康發(fā)展，并造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。
　　TMUV感染可危害多個(gè)品種鴨，包括

2、北京鴨、櫻桃谷鴨、紹興鴨、金定鴨、龍巖鴨和山麻鴨等(Tang et al.，2013)。研究表明，不僅蛋鴨可感染TMUV，而且肉鴨也可感染，肉鴨感染主要集中在3-21日齡階段(Yun et al.，2012)。2010-2012年，山東自然暴發(fā)的TMUV感染，造成5-15日齡櫻桃谷雛鴨大量死亡，死亡率高達(dá)15-35％;而育成鴨感染后，臨床癥狀輕微。該病的發(fā)生是否與日齡大小有相關(guān)性？因此，為研究日齡因素對(duì)TMUV感染的影響，本試驗(yàn)通過(guò)人工

3、感染5日齡、2周齡及5周齡3個(gè)日齡的櫻桃谷雛鴨并比較感染后結(jié)果的異同。
　　本試驗(yàn)將60只5日齡鴨，隨機(jī)分為攻毒組（40只）和對(duì)照組（20只）2組，每組隔離飼養(yǎng)。攻毒組鴨，每只鼻內(nèi)接種WFCL株TMUV病毒液4×104 ELD50;對(duì)照組鴨，每只鼻內(nèi)接種無(wú)菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS)0.4 mL。攻毒后連續(xù)觀察10d，記錄發(fā)病情況。分別于攻毒后第1，4，7和10d稱重，并隨機(jī)剖殺攻毒組和對(duì)照組鴨各5只，記錄感染鴨的臨床癥狀，剖檢變化

4、和病理組織學(xué)變化，免疫組化檢測(cè)組織中病毒分布，熒光定量RT-PCR方法檢測(cè)組織中病毒載量，血清中和試驗(yàn)測(cè)定血清中和抗體效價(jià)。2周齡和5周齡組鴨的攻毒劑量及試驗(yàn)方法與5日齡組鴨的相同。
　　臨床癥狀結(jié)果顯示，5日齡鴨感染TMUV后，部分鴨出現(xiàn)嚴(yán)重的臨床癥狀，如食欲減退直至廢絕，明顯的神經(jīng)癥狀，體重增長(zhǎng)減少約40％，顯著低于對(duì)照組。2周齡鴨感染TMUV后，臨床癥狀輕于5日齡感染鴨，并且出現(xiàn)神經(jīng)癥狀的個(gè)體數(shù)減少。而5周齡鴨感染TMUV后

5、，沒(méi)有明顯的臨床癥狀。剖檢結(jié)果顯示，5日齡組感染鴨呈現(xiàn)不同程度的腦膜充血、出血，心肌水腫、松軟，肝臟腫大，以及脾臟出血、腫大等;觀察組織切片可見(jiàn)，非化膿性腦炎，肝細(xì)胞、脾細(xì)胞及胰腺大量壞死并伴有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)等;隨著日齡的增加，剖檢病變和病理組織學(xué)病變的嚴(yán)重程度下降。免疫組化結(jié)果顯示，5日齡感染鴨組織中的陽(yáng)性細(xì)胞著色較深，且分布范圍廣，隨著日齡的增加，組織中陽(yáng)性細(xì)胞逐漸減少。在5日齡感染鴨各組織器官，可以檢測(cè)到較高的病毒拷貝數(shù)，且隨著日齡

6、的增長(zhǎng)，組織中病毒載量減少，這與臨床癥狀和組織學(xué)病變的嚴(yán)重程度相關(guān)聯(lián)，表明隨著日齡的增加，機(jī)體對(duì)TMUV的抵抗力增強(qiáng)。在感染后第1d和第4d，3個(gè)日齡組鴨均未產(chǎn)生陽(yáng)性抗體。而在感染后第7d，在部分存活的感染鴨中檢測(cè)到了陽(yáng)性抗體，在第10d，所有存活的鴨子均產(chǎn)生了陽(yáng)性抗體，并且5日齡感染鴨的血清中和抗體效價(jià)要顯著低于5周齡感染鴨。
　　本研究得出，櫻桃谷雛鴨對(duì)TMUV的易感性與感染日齡呈現(xiàn)部分相關(guān)性，且幼齡鴨更容易受到感染。目前，要