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文檔簡介
1、本研究主要根據(jù)轉基因技術設計,以高大喬木胡楊和模式植物擬南芥為研究材料。通過花序侵染法,以農(nóng)桿菌為介導將胡楊大片段基因轉移到模式植物擬南芥中。研究中利用SilwetL-77作為侵染液,在不同濃度,不同時間下,將農(nóng)桿菌中攜帶的胡楊大片段基因轉入到擬南芥中,將獲得的轉化后的種子進行抗性培養(yǎng)基的篩選,通過對可能的陽性轉化子進行DNA的提取,驗證胡楊基因是否轉入到擬南芥中,將陽性轉化子進行抗性培養(yǎng)基篩選,分子檢測、并篩選表型變化的突變體。為了更
2、進一步研究胡楊基因組學,必須獲得可以穩(wěn)定遺傳且攜帶胡楊基因的純合子,還需要繼續(xù)培養(yǎng)陽性轉化子,進行抗性篩選和傳代遺傳差異篩選。
本研究主要內容包括:⑴最佳農(nóng)桿菌菌種活化培養(yǎng)條件是YEP液體培養(yǎng)基,活化時間24h時。最佳轉化體系為300ulSilwetL-77/L侵染液侵染7min和500ulSilwetL-77/L侵染液侵染1min。⑵在轉化的862個克隆株系中,通過抗性培養(yǎng)基篩選并提取了約1500個轉化子的DNA,其中大部分
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