基于SSR標(biāo)記技術(shù)的越橘親緣關(guān)系分析及品種鑒定.pdf

1、本文建立了適用于越橘（Vaccinium spp.）品種鑒定及親緣關(guān)系分析的SSR-PCR技術(shù)體系，用SSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)22種越橘栽培品種進(jìn)行了遺傳差異及親緣關(guān)系分析，建立了一套完善的越橘品種鑒定體系，為越橘種質(zhì)資源的評(píng)價(jià)、鑒定、管理及越橘新品種的培育奠定了基礎(chǔ)。
　　建立的SSR-PCR反應(yīng)程序?yàn)?94℃預(yù)變性4min;94℃40s，55～64℃（根據(jù)引物而定）40s，72℃40s，35個(gè)循環(huán);72℃延伸8min。優(yōu)化的SSR-P

2、CR反應(yīng)體系為:20μL體系，Taq酶1.5U，Mg2+2.0nmol/μL，dNTP0.25nmol/μL，上下游引物各0.25pmol/μL，DNA模板40ng。
　　篩選出15對(duì)擴(kuò)增條帶清晰、多態(tài)性高、重復(fù)性好的引物。每對(duì)引物獲得多態(tài)性條帶3～13條，22個(gè)品種共獲得115條帶，其中113條為多態(tài)性條帶，多態(tài)性比率為98.26％。22個(gè)品種的遺傳相似性系數(shù)居于0.486～0.886之間，其中奴伊(Nui)和布魯瑞卡(Blue

3、reka)遺傳相似性系數(shù)最大;澤西(Jersey)和美登(Blomidon)遺傳相似性系數(shù)最小。使用NTSYSpc(2.10e)根據(jù)非加權(quán)組平均法（UPGMA）繪制了22個(gè)越橘品種的遺傳關(guān)系聚類圖。聚類結(jié)果顯示，供試越橘品種被分為2個(gè)大類，美登(Blomidon)被單獨(dú)聚為一類，其余的21個(gè)品種被聚為一類，此21個(gè)品種又聚為2個(gè)亞類，其中晚熟品種迪克西(Dixi)和埃利奧特(Elliot)聚在一起，另外19個(gè)中早熟品種聚在一起。說(shuō)明SS