呋喃唑酮代謝物膠體金免疫層析試紙條的研制.pdf

1、橐簍夫?qū)W工程碩士專業(yè)學位論文呋喃唑酮代謝物膠體金免疫層析試紙條的研制PreparationofFUrazodoneMetabolitecolloidalgoldteststrip論文答辯日期：2Q里壘生旦魚旦呋喃唑酮代謝物膠體金免疫層析試紙條的研制摘要硝基呋喃類藥物是一類人工合成的抗生素，因價格低廉，被廣泛用于水產(chǎn)品的病害防治。硝基呋喃類藥物半衰期很短，在動物體內(nèi)代謝迅速，且其代謝物可在機體內(nèi)穩(wěn)定存在。硝基呋喃類藥物的殘留嚴重威脅到人體

2、的健康，因此，世界各國均把硝基呋喃類藥物列為禁用漁藥。目前，用于檢測硝基呋喃類代謝物的常用方法為LCMS／MS，但這種方法需要昂貴的儀器，且前處理復雜，成本高、分析時間又長，不利于現(xiàn)場分析。而免疫層析分析法具有省時、高效、成本低等優(yōu)點，而且檢測結(jié)果重現(xiàn)性好，非常適用于現(xiàn)場檢測和大批量篩查。本研究旨在研制出呋喃唑酮代謝物膠體金免疫層析試紙條，初步建立呋喃唑酮代謝物殘留的免疫層析快速檢測方法，為商用化試紙條的開發(fā)提供方法依據(jù)。首先實驗對制備

3、膠體金的方法進行了優(yōu)化，采用三種還原方法來制備膠體金，對比制備的膠體金性能參數(shù)，選擇最優(yōu)的還原方法。實驗選擇檸檬酸三鈉還原制備膠體金，制備的膠體金粒徑為18nnl左右。利用上述方法制備的膠體金來標記AOZ單克隆抗體，制備金標探針，再將AOZ人工合成抗原(CPAOZBSA)和羊抗鼠二抗(IgG)分別包被在硝酸纖維素膜的T線和C線處，組裝成膠體金免疫層析試紙條。單抗的最佳標記量為78“g／rnL，單抗標記最佳的pH為90，抗原的最佳包被濃度

4、為10mg／mL，二抗的最佳包被濃度為10mg／mL，金標抗體的最佳稀釋倍數(shù)為2倍稀釋，膠體金免疫層析試紙條的目測檢測限為80ng／mL。試驗研究了幾種硝基呋喃類代謝物(AOZ)的結(jié)構(gòu)類似物對試紙條的特異性，實驗結(jié)果顯示：試紙條對SEM、CPSEM、AHD、CPAHD等均不發(fā)生交叉反應(yīng)性。試紙條檢測方法操作簡單，穩(wěn)定性較高，適用于呋喃唑酮代謝物殘留的現(xiàn)場初步篩選，也為其他獸藥殘留試紙條的制備提供借鑒。關(guān)鍵詞：呋喃唑酮代謝物，膠體金，免疫