甘藍型油菜遺傳多樣性分析及核心親本的指紋圖譜構建.pdf

1、我國是世界上最大的油菜生產國，也是世界上第一個成功大面積利用油菜雜種優(yōu)勢的國家。油菜雜交種由于具有產量高、抗逆性強和適應性廣等優(yōu)點，深受種子企業(yè)的親睞和廣大農民歡迎。但隨著市場商業(yè)化的不斷推進，不法經營者的人為摻假或以次充好以及混雜或以不正當手段獲取育種家的親本用于生產雜交種，損害了農民、企業(yè)和育種家的合法利益。因此，迫切需要建立對雜交油菜品種及其親本進行真實性和純度鑒定的技術體系，為親本材料的知識產權保護和維護農民的合法權益提供技術支

2、撐。SSR標記由于具有共顯性、穩(wěn)定性好、遺傳方式簡單以及能檢測多個等位位點等優(yōu)點，被廣泛應用于玉米、水稻等主要農作物品種的純度和真實性鑒定。
　　 本研究利用SSR標記對本實驗室的120份甘藍型油菜種質資源進行分析，篩選出一批多態(tài)性豐富的SSR引物，同時構建了骨干親本SSR-DNA的指紋圖譜，為油菜雜交種純度鑒定及其親本的真實性提供了可靠的參考依據(jù)。主要結果如下：⑴從120份材料中選取6個不同遺傳背景的材料所組成小樣本（包括2個

3、不育系、2個恢復系和2個常規(guī)品系），對本實驗室擁有的1938對SSR引物進行篩選，共得到多態(tài)性引物543對，經過比較選擇出帶型清晰、穩(wěn)定的SSR引物173對。⑵用173對引物對120份甘藍型油菜材料進行分析，共擴增出646條帶，其中多態(tài)性條帶512條，多態(tài)性比率為80％。一對SSR引物擴增多態(tài)性帶數(shù)為2-8個，平均為3.8個;信息多態(tài)量PIC值變化范圍0.05-0.92，平均為0.61。⑶利用512條多態(tài)性條帶對120份材料進行UMPG

4、MA聚類分析，以遺傳相似系數(shù)0.61為閥值，將120份材料分為A、B兩個大類。A類共100份材料，在相似系數(shù)0.69處劃分4個亞類，其中大部分不育系材料聚在第一亞類和第二亞類，說明不育系材料遺傳變異相對較小;而42份恢復系在兩大類中均有分布，表明恢復系材料遺傳變異比較豐富。⑷根據(jù)173對引物在其中32份核心親本中的擴增結果，對有條帶出現(xiàn)賦值為“1”，無條帶出現(xiàn)賦值為“0”，構建了32份甘藍型油菜核心親本的標準數(shù)字化指紋圖譜。同時初步設計