大豆子葉節(jié)和莖尖再生及農(nóng)桿菌介導(dǎo)的莖尖轉(zhuǎn)化影響因素的研究.pdf

1、本研究以大豆品種“合豐35”為材料，研究了不同濃度的6-BA和誘導(dǎo)時(shí)間等因素對(duì)子葉節(jié)和莖尖不定芽分化的影響，并對(duì)影響農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆莖尖轉(zhuǎn)化的幾個(gè)因素進(jìn)行了探討。為建立穩(wěn)定的大豆子葉節(jié)和莖尖再生系統(tǒng)，進(jìn)一步提高轉(zhuǎn)化效率奠定了基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下：1. 在大豆子葉節(jié)再生研究中，大豆萌發(fā)和子葉節(jié)不定芽誘導(dǎo)的最佳6-BA濃度分別為0.4 mg·l-1和1.1 mg·l-1；子葉節(jié)不定芽誘導(dǎo)的基本培養(yǎng)基B5優(yōu)于1/2MSB5；誘導(dǎo)時(shí)間為10d左

2、右。每個(gè)子葉節(jié)分化出3.56個(gè)不定芽。2. 在大豆莖尖再生研究中，不定芽誘導(dǎo)的最佳6-BA濃度為3.5 mg·l-1；最適誘導(dǎo)時(shí)間為24h左右；不同基因型大豆莖尖再生中以“東農(nóng)42”的再生頻率為最高，平均每個(gè)莖尖外植體分化出3.04個(gè)不定芽。3. 在農(nóng)桿菌介導(dǎo)的大豆莖尖轉(zhuǎn)化的影響因素研究中，初步探討了L-半胱氨酸、硝酸銀和脯氨酸對(duì)轉(zhuǎn)化的影響。初步認(rèn)為共培養(yǎng)培養(yǎng)基中分別加入600 mg·l-1 L-半胱氨酸、2 mg·l-1硝酸銀或6