蛋白質(zhì)組學(xué)方法分析雌雄異株植物黃連木性別相關(guān)的差異蛋白.pdf

1、黃連木(Pistacia chinensis Bunge)是漆樹科黃連木屬，雌雄異株落葉喬木植物。在中國，黃連木因其種子含有大量的油，作為生物柴油原料而廣泛種植。實(shí)際生產(chǎn)中為了獲得較高生物柴油的產(chǎn)量，黃連木雌株的種植成為當(dāng)前所需，因此，黃連木雌雄株早期的性別鑒定就顯得十分重要。
　　目前，黃連木雌雄株在開花之前并沒有好的方法對其性別進(jìn)行鑒定。雌雄株之間的差異通過基因表達(dá)必然在蛋白質(zhì)方面有所體現(xiàn)，為了從蛋白質(zhì)方面區(qū)分鑒定黃連木雌雄株

2、性別，我們用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法對黃連木雌雄株?duì)I養(yǎng)器官之間性別相關(guān)差異蛋白進(jìn)行了比較分析。
　　為使得到的分子標(biāo)記能用于同科屬類似植物在開花前雌雄株的鑒別，提取蛋白時(shí)選取營養(yǎng)器官（葉片和莖）而不是生殖器官作為實(shí)驗(yàn)材料。利用蛋白質(zhì)組學(xué)雙向電泳技術(shù)，在黃連木雌雄株的葉和莖中一共發(fā)現(xiàn)10個(gè)差異蛋白質(zhì)點(diǎn)，利用二級質(zhì)譜方法成功的鑒定出其中7個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，分別為NB-ARC封閉蛋白、光合作用葉綠素a/b結(jié)合蛋白、抗壞血酸過氧化物酶、翻譯起始因子5A

3、2、溫度誘導(dǎo)的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白、磷酸甘油酸激酶。這6種功能蛋白相匹配在不同的營養(yǎng)器官中，性別相關(guān)的蛋白質(zhì)表現(xiàn)出不同的組織特異性，尤其是在枝條中表現(xiàn)的最為明顯。其中最為顯著的是雌株中磷酸甘油酸激酶蛋白在枝條的韌皮部中高豐度表達(dá)，雄株中卻幾乎沒有表達(dá)，溫度誘導(dǎo)的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白在雄株枝條的木質(zhì)部和韌皮部中均顯著表達(dá)，雌株中表達(dá)含量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于雄株。
　　根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們猜想磷酸甘油酸激酶和溫度誘導(dǎo)的脂質(zhì)運(yùn)載蛋白有可能是黃連木雌雄株性別差異