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文檔簡介
1、仔豬腹瀉是養(yǎng)豬場最常見的疾病之一,該病流行面廣,常年發(fā)生,發(fā)病率和死亡率較高,造成較大的經(jīng)濟(jì)損失??咕幬锸亲胸i腹瀉防治的普遍選擇,但長期廣泛使用往往會(huì)導(dǎo)致病菌出現(xiàn)耐藥現(xiàn)象,使許多杭菌藥物對(duì)腹瀉的療效都在不斷降低。因此,研制高效、低毒、低殘留、低耐藥性的藥物已成為防治該病迫切需要解決的問題。本研究依據(jù)中獸醫(yī)理論和中藥資源開發(fā)控制仔豬腹瀉的藥物,通過組方篩選、安全性試驗(yàn)、穩(wěn)定性試驗(yàn)、藥理學(xué)試驗(yàn)等研究獲得具有良好防治仔豬腹瀉的參麥口服液。試
2、驗(yàn)分為以下幾部分:
試驗(yàn)一、鹽城地區(qū)仔豬腹瀉病原菌的分離鑒定
對(duì)鹽城地區(qū)2009~2011年部分豬場采集的仔豬腹瀉病料111份進(jìn)行了細(xì)菌分離,觀察了分離菌的形態(tài)特點(diǎn)、培養(yǎng)特性、生化特性,同時(shí)對(duì)分離菌株毒力基因進(jìn)行PCR檢測,用玻板凝集試驗(yàn)進(jìn)行血清型的鑒定。結(jié)果表明,從收集到的仔豬腹瀉病料中共分離得到30株細(xì)菌,通過形態(tài)特點(diǎn)、培養(yǎng)特性、生化特性等觀察確定為大腸桿菌。PCR檢測結(jié)果顯示,分離菌株均攜帶ST2、LT
3、1、ST1基因。30株大腸桿菌中除7株血清型未定型外,其余23株鑒定出6種血清型,其中O138所占的比例最高(56%),其次是O65(13%),O21(6%),O9(6%),O55(3%),O139(3%)。同時(shí)測定了23株大腸桿菌對(duì)10種抗菌藥的敏感性,試驗(yàn)參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NationalCommittee of Clinical and Laboratory Standards,NCCLS)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行,耐藥性檢測采用C
4、LSI(Clinical and Laboratory Standards Institute)推薦的K-B(Kirby-Bauer)法。結(jié)果表明,分離得到產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌菌株對(duì)妥布霉素、壯觀霉素、環(huán)丙沙星、慶大霉素、卡那霉素中度敏感,抑菌圈直徑在10.7~14.1mm之間,對(duì)氯霉素、四環(huán)素、洛氟殺星、嗪可霉素不敏感,抑菌圈直徑在3.7~8.4 mm之間;23株大腸桿菌對(duì)10種抗菌藥物均有不同程度的多重耐藥性。
試驗(yàn)二、
5、參麥口服液的研制
依據(jù)老中醫(yī)的經(jīng)驗(yàn)方,選擇黨參、黃芪、炒山楂、麥芽、神曲、金銀花、白頭翁等十二味中藥組成處方,用水煎法制成參麥口服液,檢查其形狀、裝量、微生物限度,鑒別黃芪甲苷,測定其穩(wěn)定性。結(jié)果表明,參麥口服液呈淡黃色,裝量檢查及微生物限度檢驗(yàn)均符合規(guī)定;供試品色譜中,在與對(duì)照品相應(yīng)的位置上顯示相同的黃色熒光斑點(diǎn),陰性對(duì)照液無此斑點(diǎn),說明樣品中含有黃芪甲苷;參麥口服液在室溫下放置12個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定。
試驗(yàn)三、參
6、麥口服液的安全性試驗(yàn)
為評(píng)價(jià)參麥口服液的安全性,測定了參麥口服液的急性和長期毒性試驗(yàn)。急性毒性試驗(yàn),用9個(gè)等比劑量的參麥口服液給小鼠灌胃,記錄各組的死亡數(shù),用改良寇氏法計(jì)算出半數(shù)致死量(LD50)。結(jié)果表明,小鼠的急性毒性反應(yīng)和死亡率與給藥劑量呈正相關(guān),參麥口服液的LD50是161.325±19.564g/kg,LD50的95%可信限為149.612~197.910g/kg。長期毒性試驗(yàn),取Sprague-Dawley大鼠
7、按每110 g體重每天投給含藥飼料4 g(受試藥物設(shè)高、中、低三個(gè)劑量,分別為50、25、12.5 g/kg(以生藥量計(jì)算),將藥物添加在基礎(chǔ)飼料中,分別制成10%、5%、2.5%的含藥飼料),對(duì)照組飼喂正常商品飼料,連用90 d,觀察測定停藥后第1d和第14d,SD大鼠的臨床癥狀、體重、血常規(guī)、血清生化指標(biāo)以及肝、腎、心、脾、肺的組織病理學(xué)變化。結(jié)果表明,試驗(yàn)組SD大鼠各項(xiàng)指標(biāo)無顯著異常。以上結(jié)果表明參麥口服液對(duì)動(dòng)物是安全,無明顯的長
8、期毒性。
試驗(yàn)四、參麥口服液對(duì)斷奶仔豬腹瀉的預(yù)防效果
選取年齡胎次相近健康母豬生產(chǎn)的日期相近仔豬20窩分為4組,每組5窩。第1、2、3組為試驗(yàn)組,從斷奶前7d開始用藥,分別按0.2 mL/kg·BW(低劑量組)、0.3mL/kg·BW(中劑量組)、0.4 mL/kg·BW(高劑量組)灌服參麥口服液,每天1次,到斷奶后14d為止。第4組為對(duì)照組,灌服相同體積的生理鹽水。于停藥后統(tǒng)計(jì)各組仔豬腹瀉的預(yù)防效果。結(jié)果顯
9、示,高、中劑量組的有效率均顯著高于對(duì)照組(P<0.01),表明參麥口服液對(duì)仔豬細(xì)菌性腹瀉有較好的預(yù)防作用,并能有效促進(jìn)仔豬的生長。
試驗(yàn)五、參麥口服液對(duì)仔豬腹瀉的治療效果
選擇日齡、體重等指標(biāo)基本相似的發(fā)病斷奶仔豬40頭,隨機(jī)分為4組,每組10頭,第1組為試驗(yàn)低劑量組,每次灌服參麥口服液5 mL;第2組為試驗(yàn)中劑量組,每次灌服參麥口服液10 mL;第3組為試驗(yàn)高劑量組,每次灌服參麥口服液15 mL;第4組為對(duì)
10、照組,每次注射鹽酸環(huán)丙沙星注射液1 mL/kg·BW。各組均每天給藥1次,連續(xù)用藥3d。觀察至停藥后7d,統(tǒng)計(jì)療效。結(jié)果顯示,參麥口服液中、高劑量組用藥1次后部分病豬即治愈,給藥2次后大部分豬治愈,有效率達(dá)90%,極顯著高于對(duì)照藥物組(P<0.01),表明參麥口服液對(duì)仔豬腹瀉有較好的治療作用。
試驗(yàn)六、母豬投服參麥散對(duì)仔豬腹瀉的預(yù)防效果
選取40頭母豬隨機(jī)分為4組,每組10頭。第1、2、3組為試驗(yàn)組,從產(chǎn)前7
11、d開始分別在日糧中加入?yún)Ⅺ溕?0 g/d、100 g/d、150 g/d,一直給藥到產(chǎn)后7d。第4組為對(duì)照組,飼喂正常日糧,于停藥后統(tǒng)計(jì)仔豬腹瀉的發(fā)生率。結(jié)果表明,高、中劑量組的有效率均高于對(duì)照組,表明母服參麥散對(duì)仔豬腹瀉有較好的預(yù)防作用,并能有效促進(jìn)仔豬的生長。
試驗(yàn)七、參麥方劑在鹽城地區(qū)的推廣應(yīng)用
在以上試驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上,近3年在鹽城市的鹽都區(qū)、亭湖區(qū)、阜寧縣、濱海縣、建湖縣、市開發(fā)區(qū)等6個(gè)縣(區(qū))進(jìn)行了
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