飼料中黃曲霉毒素B1監(jiān)測及其對蛋雞肝臟脂類代謝和抗氧化功能的影響.pdf

1、課題調(diào)研了我國飼料原料中黃曲霉毒素B1及玉米中各種霉菌毒素的污染情況，并研究了黃曲霉毒素B1對蛋雞肝臟脂類代謝和抗氧化功能等方面的影響，探討其影響途徑與機(jī)制，對生產(chǎn)提供一定的指導(dǎo)意義。
　　 從全國各省市采集84份飼料原料，利用ELISA原理，檢測其中AFB1的含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，飼料原料中AFB1的檢出率高達(dá)96.4％，但超標(biāo)率為0；飼料樣品中AFB1含量≤20μg/kg的比例為97.62％。以上結(jié)果表明，我國飼料普遍受到AFB1

2、的污染，但并非所檢測飼料原料的主要問題；可以考慮把國標(biāo)規(guī)定的飼料原料中AFB1的允許限量50μg/kg及30μg/kg改為20μg/kg，使飼料原料和產(chǎn)品的限量標(biāo)準(zhǔn)盡可能一致，以利于國家的監(jiān)管及飼料企業(yè)組織生產(chǎn)。
　　 從全國各省市具有代表性的飼料企業(yè)中，采集36份玉米飼料，利用ELISA原理，檢測其中的AFB1、ZEN、DON、OTA及FB1的含量。結(jié)果表明，DON、ZEN、AFB1和FB1的檢出率分別為100％、97.14％

3、、91.67和88.89％，OTA檢出率為0；FB1和OTA沒有超標(biāo)，DON、FB1和ZEN的超標(biāo)率分別33.33％、30.56％和14.29％，污染比較嚴(yán)重；ZEN和DON、AFB1和FB1的相關(guān)系數(shù)分別為0.512和0.489，兩者均有顯著的相關(guān)關(guān)系。
　　 分離并培養(yǎng)3日齡雌性海蘭褐雛雞肝細(xì)胞，培養(yǎng)48h后開始正式試驗(yàn)。試驗(yàn)組為含0.05μg/mLAFB1的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，處理24h。結(jié)果表明，AFB1處理顯著增加了細(xì)胞上清液

4、中GPT、GOT以及LDH的活性；顯著降低了肝細(xì)胞脂肪代謝相關(guān)基因FAS、ACC、ME、LXR、ApoB100、MTP及L-CPT1mRNA的表達(dá)，對SREBP-1cmRNA的表達(dá)無影響；顯著降低了肝細(xì)胞中Mn-SOD、Cu-Zn-SOD、GPX-Px和CATmRNA的表達(dá)；顯著增加了MDA的含量，對8-OHdG和蛋白質(zhì)羰基的含量無顯著影響；對內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)基因GRP78及GRP94mRNA的表達(dá)及GRP78蛋白水平的表達(dá)無顯著影響。以

5、上結(jié)果揭示AFB1使肝細(xì)胞受到一定程度的損傷，是通過LXRα信號通路而可能沒有通過SREBP-1c信號通路來降低肝細(xì)胞脂肪從頭合成的，并降低抗氧化功能及導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化損傷。
　　 分離并培養(yǎng)3日齡雌性海蘭褐雛雞肝細(xì)胞，培養(yǎng)48h后開始正式試驗(yàn)，分為4個(gè)處理，分別為對照、AFB1(0.5μg/mL)、ZEN(10μg/mL)及AFB1加ZEN，處理24h。結(jié)果表明，AFB1和ZEN對肝細(xì)胞脂類從頭合成相關(guān)基因FAS和ACC、脂類運(yùn)

6、輸相關(guān)基因apoB100、脂類調(diào)控因子LXR及抗氧化物酶Mn-SOD和Cu-Zn-SODmRNA的表達(dá)存在著一定的頡頏效應(yīng)，但對抗氧化物酶GPH-PxmRNA表達(dá)存在著一定的亞加性效應(yīng)。
　　 選取69周齡產(chǎn)蛋率和體重相近的健康蛋雞16羽，標(biāo)準(zhǔn)籠養(yǎng)，隨機(jī)等分為2組，試驗(yàn)組按55μg/kg體重的劑量每日14:00靜脈注射AFB1，對照組注射同劑量的DMSO，自由采食和飲水，連續(xù)注射7d后，分別于空腹?fàn)顟B(tài)下在8:00取樣。結(jié)果表明，

7、注射AFB1后，平均產(chǎn)蛋率顯著下降，體增重、平均采食量及肝臟發(fā)育指數(shù)無變化；血清中TG的含量顯著下降(P<0.01)；肝臟中L-CPT1mRNA的表達(dá)顯著升高(P<0.05)，F(xiàn)AS、ACC、ME、SREBP-1c、LXR、MTP、ApoB100及VLDL-ⅡmRNA的表達(dá)無顯著差異，肝臟中T-SOD、CAT和GSH-PX的活性及氧化損傷產(chǎn)物蛋白質(zhì)羰基、丙二醛和8-OHdG的含量均無差異。以上結(jié)果揭示，黃曲霉毒素B1對肝臟脂類的從頭合成