不同大豆與大豆花葉病毒組合中胼胝質(zhì)的熒光標(biāo)記及其功能初探.pdf

1、胼胝質(zhì),即β-1,3-葡聚糖,在植物抵抗病毒侵染中發(fā)揮的作用已經(jīng)越來越受到人們的關(guān)注,但其在大豆抗大豆花葉病毒侵染中的作用所知甚少。本試驗(yàn)選用8個(gè)大豆品種與4個(gè)不同的大豆花葉病毒株系組成的23個(gè)不同抗病級別的組合,首先通過摩擦接種對各組合進(jìn)行抗病級別的鑒定;在此基礎(chǔ)上采用點(diǎn)接種法接種病毒,通過對接種葉片與上位葉癥狀觀察、苯胺藍(lán)染色輔以熒光顯微鏡觀察和藥物學(xué)試驗(yàn),探討了不同抗病級別組合中胼胝質(zhì)積累的特點(diǎn)及其在大豆抵抗大豆花葉病毒侵染過程中

2、的作用;通過摩擦接種將病毒接入抗病組合的葉脈中,探討了胼胝質(zhì)在篩管中的積累特點(diǎn)及其在大豆抵抗大豆花葉病毒長距離運(yùn)輸中的作用。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明,大豆接種病毒后,在抗病級別分別為0-3的各個(gè)組合的葉肉細(xì)胞中,在侵染早期(接種后6-72h)不同的組合在不同時(shí)間點(diǎn)分別觀察到了胼胝質(zhì)熒光,且胼胝質(zhì)熒光出現(xiàn)的時(shí)間與抗病級別密切相關(guān),即品種的抗病性越強(qiáng)在侵染點(diǎn)處觀察到胼胝質(zhì)的時(shí)間越早;而在抗病級別為5的組合中一直未能觀察到胼胝質(zhì)熒光。另外

3、,在抗病級別為0和1級的各組合中給葉片預(yù)注射DDG(2-deoxy-D-glucose,胼胝質(zhì)合成抑制劑)再接種病毒,在上位葉能觀察到壞死斑的出現(xiàn)并且通過RT-PCR能夠檢測到大豆花葉病毒外殼蛋白基因。在抗病級別為0級的組合中,通過摩擦接種,一部分病毒進(jìn)入到接種葉片的葉脈中,在葉脈、葉柄以及莖部也發(fā)現(xiàn)有胼胝質(zhì)積累。以上結(jié)果表明,大豆被大豆花葉病毒侵染后,品種的抗病性越強(qiáng)就會在侵染點(diǎn)處越早的積累胼胝質(zhì),胼胝質(zhì)的沉積與大豆抗病毒侵染密切相關(guān)