乳酸芽孢桿菌的分離、鑒定及菌制劑制備的研究.pdf

1、抗生素的過度使用導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性和藥物殘留等問題，危害人類健康。因此，尋找抗生素的替代物對畜牧業(yè)發(fā)展具有重要意義。乳酸芽孢桿菌具有乳酸菌和芽孢桿菌的雙重特性，產(chǎn)乳酸的同時還有抗逆性強(qiáng)、耐高溫、易儲存等特點(diǎn)，比乳酸菌更適于在畜牧業(yè)中推廣應(yīng)用。本試驗(yàn)以仔豬糞便及植物根部土壤為材料，分離乳酸芽孢桿菌，并對分離得到的菌株進(jìn)行一系列的特性研究，為乳酸芽孢桿菌制劑應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)提供一定的理論依據(jù)。具體結(jié)論如下：
　　 本實(shí)驗(yàn)采用普通營養(yǎng)培養(yǎng)基

2、從菌源中分離得到26株革蘭氏陽性、有芽孢的乳酸細(xì)菌。首先對分離到的26株菌進(jìn)行抑菌性能試驗(yàn)：篩選出對仔豬黃白痢病源菌有較強(qiáng)抑制作用的15株菌；其次，采用pH1.8的培養(yǎng)液處理培養(yǎng)了72h的15株菌的菌液2h，經(jīng)體外耐酸試驗(yàn)篩選，得出8株菌，此條件下表現(xiàn)出良好耐受性且具有較高的活性；最后，在0.3％膽鹽濃度的液體培養(yǎng)基中處理2h，篩選出活菌數(shù)及存活率較高的菌株Y4、Y6、Y13、Y16。
　　 將目的菌株接種在普通營養(yǎng)培養(yǎng)基上37

3、℃培養(yǎng)24 h，觀察其特征，且在相差顯微鏡下觀察其形態(tài)特征為：細(xì)胞呈桿狀，且形成端生橢圓形芽孢，芽孢囊不明顯膨大，接觸酶陽性，初步確認(rèn)4株菌屬于芽孢桿菌屬；然后，通過生理生化試驗(yàn)初步確定Y4、Y6、Y13、Y16菌株屬于乳酸芽孢桿菌。其中，Y4、Y6是從仔豬糞便中分離得到，初步確認(rèn)為凝結(jié)芽孢桿菌，Y13、Y16是東北農(nóng)業(yè)大學(xué)大學(xué)土壤中分離，初步確認(rèn)為嗜熱脂肪芽孢桿菌。
　　 實(shí)驗(yàn)二，將目的菌株Y4、Y6、Y13、Y16及市售枯草

4、芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌的產(chǎn)消化酶及產(chǎn)酸能力對照，結(jié)果表明：α-淀粉酶產(chǎn)量由低至高為：Y16

5、　　 實(shí)驗(yàn)三，通過測定4株目的菌株混合培養(yǎng)的生長曲線得知乳酸芽孢桿菌的生長穩(wěn)定期即活菌數(shù)峰值出現(xiàn)在30小時，芽孢數(shù)峰值出現(xiàn)在36小時：通過液體發(fā)酵試驗(yàn)得出液體培養(yǎng)基配方為：80目豆粕粉1.0%，80目麥麩粉1.0%，80目玉米粉1.0%，葡萄糖1.0%，CaCO30.3%，K2HPO40.2%，MnSO4·H2O0.002%，MgSO4·7H2O0.01%，NaCl0.1%，H2O1