小麥植株再生系統(tǒng)優(yōu)化及與硝態(tài)氮代謝關(guān)系的研究.pdf

1、提高小麥成熟胚愈傷組織的誘導(dǎo)效果，對小麥高效遺傳轉(zhuǎn)化體系的建立具有十分重要的作用。因而，為了研究不同培養(yǎng)基和不同處理方式對小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)和分化的其生理特性，以豫農(nóng)202、中國春、豫麥18、矮抗58、豫農(nóng)201、豫麥21、鄭麥9023、周麥16、豫農(nóng)949、豫麥49等10種不同基因型的小麥成熟胚為材料，研究了不同培養(yǎng)基和不同處理方式對小麥成熟胚愈傷組織誘導(dǎo)和分化的影響；為了研究小麥成熟胚誘導(dǎo)和分化的生理特性，我們并對其愈傷組織誘導(dǎo)

2、和分化有關(guān)的硝酸還原酶和亞硝酸還原酶的活性進(jìn)行了分析。為了進(jìn)一步對小麥成熟胚再生機(jī)理進(jìn)行研究；我們進(jìn)行了愈傷組織長期繼代與生長、分化過程中硝態(tài)氮代謝機(jī)理的分析，旨在進(jìn)一步研究小麥成熟胚脫分化和分化的效果，為小麥成熟胚高效再生體系機(jī)理的分析提供一定基礎(chǔ)。結(jié)果表明： (1)在小麥愈傷組織誘導(dǎo)效果上MS+麥草畏基本培養(yǎng)基優(yōu)于Ms+2，4-D為基本培養(yǎng)基；低激素濃度出愈率和胚性愈傷率低，高激素濃度可以提高出愈率，但降低胚性愈傷率，2 m

3、g/L的濃度是小麥愈傷組織誘導(dǎo)的適宜激素濃度，平均出愈率和平均胚性愈傷組織分別為83.89％和15.83％。 (2)變溫處理對愈傷組織誘導(dǎo)有一定影響。對愈傷組織誘導(dǎo)前進(jìn)行4℃低溫處理、誘導(dǎo)的前48h進(jìn)行34℃高溫培養(yǎng)，而后26℃常溫培養(yǎng)的變溫處理方法普遍提高了出愈率。經(jīng)變溫處理成熟胚平均出愈率、胚性愈傷率比不進(jìn)行變溫處理成熟胚分別提高了3.22％和1.56％。 (3)繼代模式對愈傷組織質(zhì)量也有影響：愈傷組織質(zhì)量的維護(hù)以Ⅰ

4、-Ⅳ交替繼代模式(即以基礎(chǔ)培養(yǎng)基I轉(zhuǎn)接到把基礎(chǔ)培養(yǎng)基2，4-D和硝態(tài)氮濃度均減半的培養(yǎng)基IV)循環(huán)交替繼代)效果最好。 (4)不同分化前處理以震蕩洗脫48h+稀釋干燥48h對愈傷組織再生率的提高影響最明顯。10種基因型的愈傷組織在分化前進(jìn)行震蕩洗脫+吸濕干燥的平均植株再生率分別為16.20％，是愈傷組織直接誘導(dǎo)分化10.33％的1.56倍。 (5)硝態(tài)氮及其酶活性對愈傷組織誘導(dǎo)效應(yīng)的影響表現(xiàn)在Ⅱ型愈傷組織細(xì)胞NO2-含量